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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【讨论】液相色谱两化合物的分离度变小！
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yufu0522

木虫 (正式写手)

[交流] 【讨论】液相色谱两化合物的分离度变小！

用已确定的流动相（甲醇：水：醋酸：三乙胺）跑柱，开始时分离度为4.5，三天后，再跑分离度为1.5，分离不达要求，请大侠们分析一下原因。
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1楼 2010-08-27 20:35:54
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oxygen7341

木虫 (小有名气)
yufu0522(金币+3): 2010-08-30 14:26:31
台兄，你新配流动相试试看，你的分离度降低，保留时间变化了吗，要是你有ms的话，做一下lcms看看，是不是样品有问题，排除样品问题后，就看柱子和流动相了，要是柱子在中间没有受过伤的话，就只能是流动相，要是你化合物里面有对酸碱敏感的，你流动相时间长了，PH值变化，就有可能导致这样的变化。
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2楼2010-08-27 23:42:59
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lemonin2008

铁杆木虫 (正式写手)
yufu0522(金币+2): 2010-08-30 14:26:59
是不是用时间长了，柱效下降了？
流动相是不是不是新配的？ph值有要求吗？会不会是pH值的微小变化对分离度有影响？
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3楼2010-08-28 08:01:19
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音
yufu0522(金币+1): 2010-08-30 14:27:05
问题出在流动相，现用现配
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Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
4楼2010-08-28 14:59:41
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xkp123

木虫 (著名写手)
yufu0522(金币+1):c18柱 2010-08-30 14:27:24
是不是三乙胺坏柱子了？
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5楼2010-08-28 19:40:54
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jiusjiu

木虫 (正式写手)
yufu0522(金币+1): 2010-08-30 14:27:36
流动相有问题，造成实验不重复
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6楼2010-08-29 10:18:47
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冰岛猎人

金虫 (小有名气)
yufu0522(金币+1): 2010-08-30 14:27:45
是不是ph的原因把柱子搞坏了
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7楼2010-08-29 13:32:11
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panshi3000

金虫 (小有名气)
yufu0522(金币+2): 2010-08-30 14:28:15
按照经验讲，柱压能够很好的反映流动相是否变化（放置时间过长，各溶剂蒸汽压不同，挥发性不同）、柱子是否堵塞长菌。你的压力是不是跟以前一样啊？一般的柱子ph在5-10之间。最有可能是流动相比例问题，重新配。每次用完都要用水甲醇冲柱子，直到柱压正常！
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8楼2010-08-29 13:42:26
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yufu0522

木虫 (正式写手)
找到原因了！
ph有变化
水加甲醇发热，加乙酸和三乙胺，搅拌，乙酸和三乙胺有很大挥发，使ph变大，
流动相放置几天后，ph变大，
分离度变小，
加乙酸调ph，分离度达到要求！
谢谢各位！！
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9楼2010-08-30 14:34:30
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