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yufu0522

木虫 (正式写手)

[交流] 【讨论】液相色谱两化合物的分离度变小!

用已确定的流动相(甲醇:水:醋酸:三乙胺)跑柱,开始时分离度为4.5,三天后,再跑分离度为1.5,分离不达要求,请大侠们分析一下原因。
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oxygen7341

木虫 (小有名气)

yufu0522(金币+3): 2010-08-30 14:26:31
台兄,你新配流动相试试看,你的分离度降低,保留时间变化了吗,要是你有ms的话,做一下lcms看看,是不是样品有问题,排除样品问题后,就看柱子和流动相了,要是柱子在中间没有受过伤的话,就只能是流动相,要是你化合物里面有对酸碱敏感的,你流动相时间长了,PH值变化,就有可能导致这样的变化。
2楼2010-08-27 23:42:59
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lemonin2008

铁杆木虫 (正式写手)

yufu0522(金币+2): 2010-08-30 14:26:59
是不是用时间长了,柱效下降了?
流动相是不是不是新配的?ph值有要求吗?会不会是pH值的微小变化对分离度有影响?
3楼2010-08-28 08:01:19
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音

yufu0522(金币+1): 2010-08-30 14:27:05
问题出在流动相,现用现配
Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
4楼2010-08-28 14:59:41
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xkp123

木虫 (著名写手)

yufu0522(金币+1):c18柱 2010-08-30 14:27:24
是不是三乙胺坏柱子了?
5楼2010-08-28 19:40:54
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jiusjiu

木虫 (正式写手)


yufu0522(金币+1): 2010-08-30 14:27:36
流动相有问题,造成实验不重复
6楼2010-08-29 10:18:47
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冰岛猎人

金虫 (小有名气)

yufu0522(金币+1): 2010-08-30 14:27:45
是不是ph的原因把柱子搞坏了
7楼2010-08-29 13:32:11
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panshi3000

金虫 (小有名气)

yufu0522(金币+2): 2010-08-30 14:28:15
按照经验讲,柱压能够很好的反映流动相是否变化(放置时间过长,各溶剂蒸汽压不同,挥发性不同)、柱子是否堵塞长菌。你的压力是不是跟以前一样啊?一般的柱子ph在5-10之间。最有可能是流动相比例问题,重新配。每次用完都要用水甲醇冲柱子,直到柱压正常!
8楼2010-08-29 13:42:26
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yufu0522

木虫 (正式写手)

找到原因了!
ph有变化
水加甲醇发热,加乙酸和三乙胺,搅拌,乙酸和三乙胺有很大挥发,使ph变大,
流动相放置几天后,ph变大,
分离度变小,
加乙酸调ph,分离度达到要求!
谢谢各位!!
9楼2010-08-30 14:34:30
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