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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » 两个极性接近的黄酮化合物，走反相柱，怎么提高两者的分离度？
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jane-zh

金虫 (小有名气)

[求助] 两个极性接近的黄酮化合物，走反相柱，怎么提高两者的分离度？

两个极性接近的黄酮化合物，走反相柱，流动相是甲醇：水=45：55 ，出峰时间在36、37min,没分开，请问各位高手怎么分开两者，前面的几个峰都分开了。
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1楼 2011-12-20 23:53:15
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回帖置顶 ( 共有1个 )

jane-zh

金虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by zxjml2526 at 2011-12-21 10:28:30:
1、可以稍微增加水的比例或降低流速或降低温度，将保留时间稍微往后拖一下！
2、调一下pH值，看一下这两个峰对pH值的敏感程度，在判断如何调pH值，将两者分开！
3、往流动相中稍微加2%~5%的乙腈试一下！

谢谢！可以试试加乙腈。再请教一下，我设梯度了，前十分钟甲醇：水=10:90可是效果不明显，是不是跟柱效有关系啊？
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11楼2011-12-23 20:24:12
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普通回帖

痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
lk590(金币+1): 谢谢参与 2011-12-21 08:42:06
梯度、调节流动相pH、柱温。。。这个只能慢慢调试。。。
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守候在风中的宁静。
2楼2011-12-21 08:19:52
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shian

至尊木虫 (著名写手)

The moon stands for my heart

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhoudeli(金币+1): 多谢参与 2011-12-21 08:59:51
lk590(金币+1): 谢谢参与 2011-12-21 09:20:15
如甲醇实在不行，可以换换其他溶剂（如：乙腈），配以一定pH，可能会有很好的效果。
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一艘船航行在大海上！
3楼2011-12-21 08:39:39
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zxjml2526

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhoudeli(金币+1): 多谢参与 2011-12-21 11:07:30
1、可以稍微增加水的比例或降低流速或降低温度，将保留时间稍微往后拖一下！
2、调一下pH值，看一下这两个峰对pH值的敏感程度，在判断如何调pH值，将两者分开！
3、往流动相中稍微加2%~5%的乙腈试一下！
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4楼2011-12-21 10:28:30
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shian

至尊木虫 (著名写手)

The moon stands for my heart
★
zhoudeli(金币+1): 多谢参与 2011-12-21 11:07:45
我分离无论是C-苷，还是O-苷的黄酮，用乙腈时（pH 3.0）峰形都比用甲醇时好很多,你可以试试
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一艘船航行在大海上！
5楼2011-12-21 10:47:24
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhychen2008(金币+1): 多谢回帖交流 2011-12-21 22:05:29
流动相是甲醇：水=45：55 ，出峰时间在36、37min,没分开，建议走梯度吧
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gwmgyp
6楼2011-12-21 14:30:11
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
zhychen2008(金币+1): 有理 2011-12-21 22:06:01
最好给张图，帮你设计一个梯度洗脱条件
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gwmgyp
7楼2011-12-21 14:31:46
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standswim

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhychen2008(金币+1): 多谢参与 2011-12-21 22:05:45
流动相改成甲醇：水=35：65 吧
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8楼2011-12-21 14:33:42
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你好小乐

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhychen2008(金币+1): 多谢参与 2011-12-23 19:51:04
实在不行在将要出峰的位置把流速改小一些吧，例如0.8ml/min
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9楼2011-12-23 16:32:01
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jane-zh

金虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by 你好小乐 at 2011-12-23 16:32:01:
实在不行在将要出峰的位置把流速改小一些吧，例如0.8ml/min

谢谢你啊，我在前十分钟设了一个梯度，甲醇：水=10:90，这两个峰还是没有分开
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10楼2011-12-23 20:16:38
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