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赵素会

新虫 (初入文坛)

[求助] 跪求高效液相中磷酸与甲醇作流动相的问题

各位前辈,我是一个才做高效不久的新人,想请教一些问题,我做的是中药中的维生素c的含量测定,用的流动相是0.1%磷酸-甲醇=93:7有的人说这样的比例伤柱子,但是我试过90:10效果不好,还有进几针之后,用什么冲柱子再进针呢?是用甲醇-水冲柱然后平衡,还是用纯甲醇冲柱呢?我觉得如果用纯甲醇冲的话,那后来的流动相会不会在甲醇中析出来?请各位高手指教啊!

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xuanchenzi2004

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
赵素会: 金币+6, ★★★很有帮助 2014-08-27 18:17:45
赵素会: 金币+3 2014-08-27 20:55:21
这个问题不需要高手。
有的人说会伤柱子,这个观点有些片面。色谱公司一般会建议C18色谱柱,有机相比例大于10%,主要是怕硅胶表面“干涸”。                    事实是,你大胆的用吧。只要你一次运行不过长,如24h,一点问题都不会有。    进几针后,为什么要冲洗柱子呢?有强保留物质残留??      如果不是的话,直接进一针100微升的甲醇就OK了,一针不够2针,没有必要冲洗系统。      高盐比例的流动相才会析出,单纯磷酸怎么会析出呢?再说浓度本来就很低了。
2楼2014-08-27 13:45:34
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zky_panmeng

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
赵素会: 金币+6, 博学EPI+1, ★★★很有帮助 2014-08-27 18:18:01
同意2楼的说法,你有7%的有机相,不至于那么伤柱子,我还经常遇到低比例有机相检测东西的时候,你也可以尝试走梯度,就是有机相比例逐渐升高,比如20分钟内,甲醇从5%变到20%,这样峰形哟比等比例有机相好看,而且高比例有机相自然起到了冲柱子的效果
3楼2014-08-27 16:27:22
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赵素会

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zky_panmeng at 2014-08-27 16:27:22
同意2楼的说法,你有7%的有机相,不至于那么伤柱子,我还经常遇到低比例有机相检测东西的时候,你也可以尝试走梯度,就是有机相比例逐渐升高,比如20分钟内,甲醇从5%变到20%,这样峰形哟比等比例有机相好看,而且高 ...

对不起啊前辈金币不多,所以回馈的少,不过真的谢谢你
4楼2014-08-27 20:21:39
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赵素会

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xuanchenzi2004 at 2014-08-27 13:45:34
这个问题不需要高手。
有的人说会伤柱子,这个观点有些片面。色谱公司一般会建议C18色谱柱,有机相比例大于10%,主要是怕硅胶表面“干涸”。                    事实是,你大胆的用吧。只要你一次运行不过长,如2 ...

冲下柱子是因为做的是中药,怕杂质留在柱子中所以冲洗
5楼2014-08-27 20:32:28
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赵素会

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zky_panmeng at 2014-08-27 16:27:22
同意2楼的说法,你有7%的有机相,不至于那么伤柱子,我还经常遇到低比例有机相检测东西的时候,你也可以尝试走梯度,就是有机相比例逐渐升高,比如20分钟内,甲醇从5%变到20%,这样峰形哟比等比例有机相好看,而且高 ...

你是说我走流动相的时候可以梯度吗?可是我的样品在磷酸-甲醇=93:7的时候才能分开啊
6楼2014-08-27 20:55:11
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