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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 安捷伦液相色谱用磷酸做流动相如何清洗柱子
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muzheng88

铁虫 (小有名气)

[求助] 安捷伦液相色谱用磷酸做流动相如何清洗柱子

如题，安捷伦液相色谱用0.3%的磷酸作为流动相如何清洗柱子？能详细说明吗？用磷酸做流动相是不是对柱子损伤比较大？哪些大虾帮帮忙，不胜感激
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1楼 2012-11-12 09:44:01
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wjg6670

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
听不到: 金币+1, 谢谢你的解答，有空常来分析板块 2012-11-12 16:49:15
没关系，尽管用。仅是磷酸而非盐类物质，甲醇冲也可以，磷酸溶解在甲醇中。保险起见，一般先用水冲洗20倍柱体积再用甲醇冲洗20倍柱体积即可。
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4楼2012-11-12 13:37:00
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wjg6670

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by muzheng88 at 2012-11-13 19:12:42
谢谢大虾，那像我这样的流动相，用安捷伦的能测含有磷酸盐缓冲溶液（磷酸二氢钠和磷酸氢二钠）的有机物吗？有人说磷酸盐不溶于甲醇溶于析出，对探针和柱子有损伤，是这样吗？...

磷酸盐不溶于纯甲醇，但反相色谱流动相多是甲醇乙腈与水不同配比构成，浓度不是很高的情况下，使用后用水冲柱，没问题，仪器没那么娇贵。
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11楼2012-11-14 11:55:15
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zhuting8808

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
听不到: 金币+1, 鼓励参与交流，有空常来分析板块 2012-11-12 10:36:13
可以把0.3%磷酸溶液换成超纯水按你以前的比例先冲半个小时左右，再换成甲醇：水=1:1冲半个小时左右，最后用纯甲醇保存柱子。反正我是这样做的，希望对你有帮助
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2楼2012-11-12 10:28:23
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wddmq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
听不到: 金币+1, 感谢专家的解答 2012-11-12 16:48:41
冲柱子按照上面说的冲就可以了，至于磷酸伤不伤柱子，那得看你的浓度了，不是磷酸浓度特别大的话一般都不怎么伤柱子
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1234
3楼2012-11-12 13:25:46
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wjg6670

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by muzheng88 at 2012-11-12 16:14:53
请问下20倍柱体积是不是柱子体积的20倍?这算下来体积太大了啊。...

是指死体积，一般柱子死体积最大也就1.5-2.0ml，20倍体积即30-40ml，在1.0ml/min流量下冲洗30-40min即可。
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7楼2012-11-12 17:10:35
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
水-甲醇=85:15冲30分钟，再换水-甲醇=50:50冲20分钟，最后用水-甲醇=10:90冲30分钟就可以了啊
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8楼2012-11-12 20:09:36
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yyxiaoxi

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没关系，只要先拿水0.3流速冲洗半个小时左右，再用甲醇或乙腈冲洗就可以了。只要不是缓冲盐不用水冲也都没问题。
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9楼2012-11-13 18:31:54
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yyxiaoxi

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by muzheng88 at 2012-11-14 15:47:01
请问下冲洗柱子流速设置为多少合适呢？0.5%的磷酸对进样针有影响吗？液相能测含磷酸盐缓冲溶液（磷酸二氢钠和磷酸氢二钠）的有机物吗？...

0.3到0.5流速都可以。0.5%磷到进样针没影响，进样后把针用甲醇洗洗就可以了。可以测缓冲盐溶液的有机物，如果你用缓冲盐做流动相的话就用完仪器后用水多走一会，把缓冲盐洗出来再用甲醇冲洗。另外再把进样口好好洗洗。如果只是你测定的有机物中含有缓冲盐溶液那就没多大问题，你进样量是很少的，正常冲洗就可以了。
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14楼2012-11-15 11:46:58
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普通回帖

muzheng88

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wjg6670 at 2012-11-12 13:37:00
没关系，尽管用。仅是磷酸而非盐类物质，甲醇冲也可以，磷酸溶解在甲醇中。保险起见，一般先用水冲洗20倍柱体积再用甲醇冲洗20倍柱体积即可。

请问下20倍柱体积是不是柱子体积的20倍?这算下来体积太大了啊。
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5楼2012-11-12 16:14:53
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)
首先得说明是什么柱子啊。。。。。
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中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
6楼2012-11-12 16:30:49
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muzheng88

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wjg6670 at 2012-11-12 17:10:35
是指死体积，一般柱子死体积最大也就1.5-2.0ml，20倍体积即30-40ml，在1.0ml/min流量下冲洗30-40min即可。...

谢谢大虾，那像我这样的流动相，用安捷伦的能测含有磷酸盐缓冲溶液（磷酸二氢钠和磷酸氢二钠）的有机物吗？有人说磷酸盐不溶于甲醇溶于析出，对探针和柱子有损伤，是这样吗？
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10楼2012-11-13 19:12:42
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