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李培迪

新虫 (初入文坛)

[求助] 液相测ATP等磷酸肌酐如何分离ATP、IMP? 已有1人参与

各位液相的高手帮帮我啊,我用安捷伦1260测ATP等的含量,色谱条件为:ODS柱(250*4.6,5um)
                                                                                                                 DAD检测器,温度为26℃,波长254nm,流速1ml/min,进样量20ul
                                                                                                                   流动相为8%甲醇和92%磷酸盐缓冲液(0.05M,pH6.7)
                            各单标的保留时间为ATP3.364min,IMP3.334min,ADP3.657min,AMP4.716min,混标图只能出现三个峰,ATP和IMP的峰混一起了,现在想请问大家如何分离ATP和IMP呢?我接触液相,请大家教教我,先谢谢大家了。
下图依次为2ug/ml 、6ug/ml的混合标准液色谱图、ADP、AMP、ATP、IMP的单标液色谱图。

液相测ATP等磷酸肌酐如何分离ATP、IMP?
2.png


液相测ATP等磷酸肌酐如何分离ATP、IMP?-1
6.png


液相测ATP等磷酸肌酐如何分离ATP、IMP?-2
ADP.png


液相测ATP等磷酸肌酐如何分离ATP、IMP?-3
AMP.png


液相测ATP等磷酸肌酐如何分离ATP、IMP?-4
ATP.png


液相测ATP等磷酸肌酐如何分离ATP、IMP?-5
IMP.png
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洁儿viola

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你试试用100%水相
2楼2015-10-12 19:45:57
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