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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相测ATP等磷酸肌酐如何分离ATP、IMP？
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李培迪

新虫 (初入文坛)

[求助] 液相测ATP等磷酸肌酐如何分离ATP、IMP？ 已有1人参与

各位液相的高手帮帮我啊，我用安捷伦1260测ATP等的含量，色谱条件为：ODS柱（250*4.6,5um)
                                                                                                                 DAD检测器，温度为26℃，波长254nm,流速1ml/min，进样量20ul
                                                                                                                   流动相为8%甲醇和92%磷酸盐缓冲液（0.05M，pH6.7)
                            各单标的保留时间为ATP3.364min，IMP3.334min，ADP3.657min，AMP4.716min，混标图只能出现三个峰，ATP和IMP的峰混一起了，现在想请问大家如何分离ATP和IMP呢？我接触液相，请大家教教我，先谢谢大家了。
下图依次为2ug/ml 、6ug/ml的混合标准液色谱图、ADP、AMP、ATP、IMP的单标液色谱图。

液相测ATP等磷酸肌酐如何分离ATP、IMP？
2.png


液相测ATP等磷酸肌酐如何分离ATP、IMP？-1
6.png


液相测ATP等磷酸肌酐如何分离ATP、IMP？-2
ADP.png


液相测ATP等磷酸肌酐如何分离ATP、IMP？-3
AMP.png


液相测ATP等磷酸肌酐如何分离ATP、IMP？-4
ATP.png


液相测ATP等磷酸肌酐如何分离ATP、IMP？-5
IMP.png
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1楼 2014-06-19 22:31:12
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洁儿viola

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你试试用100%水相
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2楼2015-10-12 19:45:57
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