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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 安捷伦柱子使用求助
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crystalty

银虫 (小有名气)

[求助] 安捷伦柱子使用求助已有4人参与

各位虫友，请教大家关于安捷伦柱子的使用和保存问题。我想测定发酵液中的有机酸含量，订制了Agilent Zorbax Stable Bond-Aq色谱柱。大家有没有用过这个柱子，流动相一般用什么，可以用稀硫酸吗？还有柱子使用前如何处理？如果用磷酸盐缓冲液，柱子怎么保养？以前没做过HPLC，一点概念都没有，拜谢各位虫友了！
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1楼2014-08-20 09:37:43
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
安捷伦这个是一个极性耐水的C18柱，并不是做有机酸的最好选择。
建议你用氢型的阳离子交换的柱子做，例如Phenomenex的ROA，这款可以用稀硫酸做流动相，对短碳链的有机酸保留也要好很多
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人生若只如初见...
2楼2014-08-20 09:48:47
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nathalie1983

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
稀硫酸作流动相没用过，但只要别超出这款柱子的使用PH范围，应该是没问题的。新色谱柱一般可以先用高浓度的有机相冲洗一下，再使用。不过我们一般直接用，只要色谱柱柱床没有干，直接用应该没问题。若用磷酸盐体系，只要在切换流动相时，保证二者之间是互溶的，别析出盐，堵了系统即可。用完之后，用低浓度有机相过渡后，保存在高浓度的有机相中即可。使用时，注意色谱柱的温度，压力上限，别超出此范围。
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3楼2014-08-20 18:23:35
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
绝对不可以用稀硫酸 柱子的前如何处理同一般的C18柱哈 用磷酸盐缓冲液后 先用高比例的水相冲 再保存在甲醇里面
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4楼2014-08-20 20:41:22
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pipwang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

检测有机酸，可以采用离子抑制色谱法，查一下待测有机酸的PKa值，选择pKa±2范围以外的pH作为流动相的pH。
我们测乳酸用的是磷酸
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5楼2014-08-28 11:31:46
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