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安捷伦柱子使用求助
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crystalty
银虫
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专业: 微生物生理与生物化学
[
求助
]
安捷伦柱子使用求助
已有4人参与
各位虫友,请教大家关于安捷伦柱子的使用和保存问题。我想测定发酵液中的有机酸含量,订制了Agilent Zorbax Stable Bond-Aq色谱柱。大家有没有用过这个柱子,流动相一般用什么,可以用稀硫酸吗?还有柱子使用前如何处理?如果用磷酸盐缓冲液,柱子怎么保养?以前没做过HPLC,一点概念都没有,拜谢各位虫友了!
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1楼
2014-08-20 09:37:43
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nathalie1983
铜虫
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专业: 药物设计与药物信息
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
稀硫酸作流动相没用过,但只要别超出这款柱子的使用PH范围,应该是没问题的。新色谱柱一般可以先用高浓度的有机相冲洗一下,再使用。不过我们一般直接用,只要色谱柱柱床没有干,直接用应该没问题。若用磷酸盐体系,只要在切换流动相时,保证二者之间是互溶的,别析出盐,堵了系统即可。用完之后,用低浓度有机相过渡后,保存在高浓度的有机相中即可。使用时,注意色谱柱的温度,压力上限,别超出此范围。
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3楼
2014-08-20 18:23:35
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daisyzhangwei
木虫
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注册: 2006-05-15
性别:
MM
专业: 色谱分析
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
安捷伦这个是一个极性耐水的C18柱,并不是做有机酸的最好选择。
建议你用氢型的阳离子交换的柱子做,例如Phenomenex的ROA,这款可以用稀硫酸做流动相,对短碳链的有机酸保留也要好很多
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人生若只如初见...
2楼
2014-08-20 09:48:47
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lifucheng
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在线: 730.1小时
虫号: 578772
注册: 2008-07-04
性别: GG
专业: 电化学分析
管辖:
分析
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
绝对不可以用稀硫酸 柱子的前如何处理同一般的C18柱哈 用磷酸盐缓冲液后 先用高比例的水相冲 再保存在甲醇里面
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4楼
2014-08-20 20:41:22
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pipwang
金虫
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虫号: 804815
注册: 2009-07-07
性别: GG
专业: 病原真菌学
【答案】应助回帖
检测有机酸,可以采用离子抑制色谱法,查一下待测有机酸的PKa值,选择pKa±2范围以外的pH作为流动相的pH。
我们测乳酸用的是磷酸
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5楼
2014-08-28 11:31:46
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