应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » CO-ip试剂盒细节问题
81/1返回列表
查看: 2380  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

大鱼大鱼

新虫 (初入文坛)

[求助] CO-ip试剂盒细节问题 已有2人参与

1、co-ip的试剂盒洗脱用的是tris  pH9.5以及EB  问是洗脱前将9.5和EB混合再洗脱柱子呢还是先用EB洗脱完成后再加9.5呢？
2、抗体用什么稀释好呢?TBS-T还是封闭液？？
求助啊！谢谢！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-08-20 08:26:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-08-20 19:06:15
大鱼大鱼: 金币+1, ★有帮助 2014-08-22 23:32:12
文库中的Co-IP试剂盒中文说明
http://wenku.baidu.com/view/997cf21014791711cc791771.html
赞一下 回复此楼
人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
2楼2014-08-20 13:49:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大鱼大鱼

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-08-20 13:49:40
文库中的Co-IP试剂盒中文说明
http://wenku.baidu.com/view/997cf21014791711cc791771.html

感谢链接，这个说明很早就看过了。洗脱buffer加入pH 9.5的1M Tris来快速中和洗脱液。就是不明白是先洗脱下来再加Tris 9.5还是在洗脱前先中和洗脱液。
赞一下 回复此楼
3楼2014-08-20 21:58:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zero19871029

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
大鱼大鱼: 金币+4, ★★★★★最佳答案 2014-08-22 23:32:01
洗脱下来后再中和，先中和了就洗不下来了~
赞一下 回复此楼
4楼2014-08-21 08:51:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大鱼大鱼

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zero19871029 at 2014-08-21 08:51:28
洗脱下来后再中和，先中和了就洗不下来了~

亲，为什么呢？洗脱前中和PH和洗脱后再中和有什么区别呢？这是什么原因导致要中和PH的呢？
赞一下 回复此楼
5楼2014-08-21 16:23:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zero19871029

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 大鱼大鱼 at 2014-08-21 16:23:18
亲，为什么呢？洗脱前中和PH和洗脱后再中和有什么区别呢？这是什么原因导致要中和PH的呢？...

这个是洗脱的原理，用酸将蛋白从agarose上洗脱下来，再用碱来中和
赞一下 回复此楼
6楼2014-08-21 17:14:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大鱼大鱼

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zero19871029 at 2014-08-21 17:14:53
这个是洗脱的原理，用酸将蛋白从agarose上洗脱下来，再用碱来中和...

再请教一下，一共离心三次，是每一次先用EB洗脱下来马上就加9.5，还是先三次洗脱下来完成后再加9.5呢？
赞一下 回复此楼
7楼2014-08-21 21:11:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zero19871029

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 大鱼大鱼 at 2014-08-21 21:11:34
再请教一下，一共离心三次，是每一次先用EB洗脱下来马上就加9.5，还是先三次洗脱下来完成后再加9.5呢？...

如果对蛋白的活性要求高的话还是每次都加吧，毕竟酸性环境对蛋白活性的伤害还是蛮大的
赞一下 回复此楼
8楼2014-08-25 17:35:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 大鱼大鱼 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 23jxep3nCNZb 2026-09-14 4/200 2026-09-15 18:11 by CgyNCDVNhGVg
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 17:15 by CgyNCDVNhGVg
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:50 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:35 by CgyNCDVNhGVg
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-15 16:26 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-15 14:50 by VMDqgnlKimtZ
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-15 14:25 by VMDqgnlKimtZ
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:14 by C79jjtjAKjEn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:58 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 07:02 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-15 06:49 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:14 by 5BDX0d0WFp7t
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:25 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 21:37 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:25 by vZfe6xYu34yj
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[基金申请] 求教各位大神：2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀？ +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
[找工作] 浙江师范大学是怎么坑我的 +6 recruit123 2026-09-09 6/300 2026-09-14 12:00 by 萨仁其其格
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭