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wu_chunhui

金虫 (小有名气)

[求助] 染色体步移结果该如何解释? 已有2人参与

这是我做染色体步移的结果,我是新手,第一次做,结果发现一次PCR的结果很亮而二次三次PCR的结果几乎没有,这是什么原因呢?是PCR原液稀释的原因吗?另外我跑的琼脂糖凝胶电泳图感觉不是很好看,这是什么原因?

染色体步移结果该如何解释?
iocas 2014-08-19 08hr 25min.jpg
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daodao8657

金虫 (小有名气)

请问下LZ是用试剂盒吗?如果是的话用的是哪个公司的?
9楼2014-12-09 16:05:32
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wu_chunhui

金虫 (小有名气)

样品顺序是Lane1 marker; Lane2-5 SP1 AP1-AP4; Lane6 marker; Lane7-10 SP2 AP1-AP4; Lane11 marker; Lane12-15 SP3 AP1-AP4
2楼2014-08-19 08:54:33
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watc1989

新虫 (小有名气)

★ ★
wu_chunhui(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-19 20:25:43
引用回帖:
2楼: Originally posted by wu_chunhui at 2014-08-19 08:54:33
样品顺序是Lane1 marker; Lane2-5 SP1 AP1-AP4; Lane6 marker; Lane7-10 SP2 AP1-AP4; Lane11 marker; Lane12-15 SP3 AP1-AP4

不知道你的marker大小,我觉得你的AP3,AP4第2,3轮应该是成功的,因为产物比第一轮大小要小。但是不知道你的sp3离你的序列边界有多远,如果第三轮的产物大小大于sp3到边界的长度,那么可以把第三轮多配几个重复进行切胶回收。胶跑得不好看是不是可以换换电泳缓冲液。。
3楼2014-08-19 10:07:21
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wu_chunhui

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by watc1989 at 2014-08-19 10:07:21
不知道你的marker大小,我觉得你的AP3,AP4第2,3轮应该是成功的,因为产物比第一轮大小要小。但是不知道你的sp3离你的序列边界有多远,如果第三轮的产物大小大于sp3到边界的长度,那么可以把第三轮多配几个重复进行 ...

非常感谢!
4楼2014-08-19 18:00:21
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