| 查看: 1706 | 回复: 16 | |||
[交流]
有木有谁建立细胞株的呀，求经验
|
|||
| 将目的基因导入肿瘤细胞建立稳定表达该基因的细胞株，用药物G418进行筛选，但是效果不理想，在进行两次加药处理（约三天）后，对照组细胞（没有转染目的质粒的）竟然比实验组还多，这是为什么呢，求解，我按照之前老师做过的，细胞百分之八十进行转染，二十四小时后换液，二十四小时后加药筛选的。 |
回复此楼» 猜你喜欢
某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感
已经有10人回复
-
今天务委会开完了，明天出结果吗
已经有11人回复
-
有没有大神帮我看看基金代码
已经有9人回复
-
2026国自然函评费到账
已经有23人回复
-
在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。
已经有8人回复
-
今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果
已经有22人回复
-
放榜前的不淡定
已经有18人回复
-
什么时候开奖？
已经有13人回复
-
如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》
已经有8人回复
-
没有任何消息-是不是就凉了
已经有10人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于293T细胞的问题，急求助
已经有43人回复
- 细菌的1CFU相当于含有多少个细菌细胞？求经验丰富大侠给予帮助。
已经有4人回复
- 十万火急，小弟实验室的PC12细胞最近总是被污染（有图），求解救办法
已经有16人回复
- 细胞传代一个星期后才污染，求原因
已经有5人回复
- 最新实验室的细胞之间出现了好多小点污染，求有经验的大神给参谋下（有图）
已经有16人回复
- 细胞株是上海还是北京还是南京的比较好呢？
已经有16人回复
- 关于悬浮细胞MTT的一点疑问，求解答！
已经有11人回复
- 求友情赠送白血病细胞株，叩谢啦
已经有7人回复
- 超声破碎细胞心得
已经有25人回复
- 养细胞的技术，心得
已经有30人回复
- 【求助/交流】关于昆虫细胞Sf9的一些问题！大虾请进！
已经有17人回复
- 【求助/交流】CHO细胞结团问题
已经有9人回复
- 【求助/交流】新手上路，大家来助！！！关于细胞培养中换液的两个问题！
已经有19人回复
- 【求助/交流】细胞传代时怎么都吹不下来啊！
已经有23人回复
- 【交流】关于建立细胞实验室
已经有19人回复
- 【求助/交流】悬浮细胞附着壁底的问题 K562
已经有8人回复
- 【求助/交流】六孔板接种细胞系，最大细胞数能达到三百万吗？
已经有10人回复
- 【求助/交流】[急问]为什么我的HFL-I细胞长的这么慢
已经有10人回复
- 【求助】一种细胞的名字,有两个代号怎么回事?
已经有6人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
告别流水线爽文！108万字完结仙侠《女娲石之灵石奇缘（仙界篇）》值得细品
+1/5021
-
2026年工程管理与智慧城市国际会议 (EMSC 2026)
+1/590
-
小木虫认识的老公在一起11年，去世快100天了。
+2/354
-
真诚征友
+1/174
-
基金祈福
+1/153
-
散金币
+1/120
-
[IEEE出版|EI检索|推荐至SCI专刊]第22届国际电子商务工程会议征稿3天倒计时!
+1/98
-
从反复试错到智驱突破：固态电池研发的效率跃迁之路
+1/89
-
华中科技大学罗志强教授课题组招收2027年秋季入学博士研究生
+2/54
-
武汉，诚征男友，不异地，年龄大了
+1/35
-
【即将截止】东北大学理学院 力学 李健组2027级保研
+1/7
-
中山大学智能传感仪器方向招2027届考核制博士生
+1/6
-
中科院大连化学物理研究所 招聘 催化剂研发方向 科研助理 2名
+1/4
-
祈祷老公中国基
+1/3
-
新审查指南施行半年，AI方向的专利申请是不是更看"技术味"了？
+1/2
-
南方医科大学深圳医院陈烨/余涛教授课题组联合培养博士后招聘
+1/2
-
出全新蔡司 Plan?APOCHROMAT 20×/0.8 平场复消色差物镜
+1/2
-
2027年博士申请
+1/1
-
博士后申请基金命中的概率有多大？
+1/1
-
【即将截止】东北大学理学院 力学 李健组2027级保研
+1/1
2楼2014-08-17 12:12:17
3楼2014-08-17 12:19:19
8楼2014-08-17 13:03:11
12楼2014-08-17 15:59:16
13楼2014-08-17 16:00:45
14楼2014-08-17 16:40:44
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
1 不同细胞株对G418的耐受浓度时不一样的，即使相同细胞株，在不同实验室的耐受浓度也不会完全一致，更何况G418B不同厂家，不同批次的活性都是不一样的。所以在筛选之前，要摸索细胞株对G418的耐受浓度，一般是找连续培养2周，细胞刚好全死的浓度。 2 3天是看不出效果的，G418是抑制蛋白的合成，人如果2天不吃蛋白，只吃糖类，也不会死的。细胞也一样。3天就死，你也小看生命的韧性了。 3 对照组细胞（没有转染目的质粒的）竟然比实验组还多，可能的原因，如果G418的时间和浓度都很低，就不考虑G418的毒性。对照组的质粒少了目的基因，要产生的蛋白就少，代谢负荷就小，长得当然快了！ |
15楼2014-08-17 16:45:30
16楼2014-08-17 17:15:32
简单回复
2014-08-17 12:28
回复
14_812(金币+1): 谢谢参与
dmbb5楼
2014-08-17 12:31
回复
14_812(金币+1): 谢谢参与
2014-08-17 12:48
回复
14_812(金币+1): 谢谢参与
tableman7楼
2014-08-17 12:52
回复
14_812(金币+1): 谢谢参与
ma-yue9楼
2014-08-17 13:26
回复
14_812(金币+1): 谢谢参与
chyzm10楼
2014-08-17 14:07
回复
14_812(金币+1): 谢谢参与
唐tjg11楼
2014-08-17 14:12
回复
14_812(金币+1): 谢谢参与
14_81217楼
2014-08-17 17:16
回复
