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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » ELISA 第一次测能测出，第二次测不出？
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st.nova2012

新虫 (小有名气)

[求助] ELISA 第一次测能测出，第二次测不出？ 已有4人参与

各位同志大家好。
我现在是用ELISA测小鼠血浆中的IL-1beta，买的国产试剂盒。
开封后第一次测，样品是能测出来的，浓度在标曲范围内。
因为结果不好，一周后又重复了一次，第二次的血浆是实验前两天新取的血浆，分离后冻存在-80℃，取出后在4℃下解冻，按说明书要求实验。
结果，我的标曲没问题，但所有的样品孔吸光度都跟空白空差不多，根本没法计算，跟第一次的吸光度差很多。
不知道大家在实验中有没有遇到这种情况。
因为是第一次没用完，未用的孔是密封在4℃的（这个是按说明书），实验时随意安置在架子上，所以不应该是试剂盒材料出了问题。
但样品是跟第一次一样操作的，离心，冻存，解冻条件都一样。
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1楼 2014-08-12 10:55:52
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st.nova2012

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wolfman840 at 2014-08-12 11:11:59
是否样品稀释过程中搞错了，样品稀释到了检测限度以下。否则应该会有吸光度，不至于什么都没有。

没有稀释，血浆直接加样的
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3楼2014-08-12 12:19:44
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wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是否样品稀释过程中搞错了，样品稀释到了检测限度以下。否则应该会有吸光度，不至于什么都没有。
赞一下 回复此楼
2楼2014-08-12 11:11:59
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berniehuang

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
标曲没问题的话，说明就是样本的原因了。有没有第一次检测过的样本再检测一次做个对照呢？
赞一下 回复此楼
4楼2014-08-13 13:47:48
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逍潇

铁杆木虫 (著名写手)
国产的ELISA试剂盒你也敢用
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2014-08-13 16:32:52
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查看全部 18 个回答
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