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st.nova2012

新虫 (小有名气)

[求助] ELISA 第一次测能测出,第二次测不出? 已有4人参与

各位同志大家好。
我现在是用ELISA测小鼠血浆中的IL-1beta,买的国产试剂盒。
开封后第一次测,样品是能测出来的,浓度在标曲范围内。
因为结果不好,一周后又重复了一次,第二次的血浆是实验前两天新取的血浆,分离后冻存在-80℃,取出后在4℃下解冻,按说明书要求实验。
结果,我的标曲没问题,但所有的样品孔吸光度都跟空白空差不多,根本没法计算,跟第一次的吸光度差很多。
不知道大家在实验中有没有遇到这种情况。
因为是第一次没用完,未用的孔是密封在4℃的(这个是按说明书),实验时随意安置在架子上,所以不应该是试剂盒材料出了问题。
但样品是跟第一次一样操作的,离心,冻存,解冻条件都一样。
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逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

国产的ELISA试剂盒你也敢用
5楼2014-08-13 16:32:52
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逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by st.nova2012 at 2014-08-13 18:21:37
进口的贵死爹啦,老板没钱,不舍的这么花啊...

IL-1beta和TNFalpha、IL-6都属于炎症因子,这类因子在空白小鼠血清或血浆中的含量是很低的,我用过eBioscience的ELISA盒子测BALB/C 血清的TNFalpha和IL-6都没测出来,用所谓的RD分装的国产盒子测出来有颜色,反正我是不相信这个结果的。
9楼2014-08-14 10:36:21
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逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by berniehuang at 2014-08-20 17:23:15
R&D发表过声明,明确表示没有分装产品。所以所谓的R&D分装百分之百都是假货。...

嗯,所以今后都不会用所谓的R&D分装。国产的很多ELISA kit也相当不靠谱,说明书跟所谓的R&D分装里的说明书写得一模一样。现在做实验都不敢用国产的ELISA盒子了
11楼2014-08-20 17:27:25
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