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st.nova2012

新虫 (小有名气)

应助: 22 (小学生)
金币: 2.9
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帖子: 234
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虫号: 1870903
注册: 2012-06-27
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专业: 神经精神药物药理

[求助] ELISA 第一次测能测出，第二次测不出？已有4人参与

各位同志大家好。
我现在是用ELISA测小鼠血浆中的IL-1beta，买的国产试剂盒。
开封后第一次测，样品是能测出来的，浓度在标曲范围内。
因为结果不好，一周后又重复了一次，第二次的血浆是实验前两天新取的血浆，分离后冻存在-80℃，取出后在4℃下解冻，按说明书要求实验。
结果，我的标曲没问题，但所有的样品孔吸光度都跟空白空差不多，根本没法计算，跟第一次的吸光度差很多。
不知道大家在实验中有没有遇到这种情况。
因为是第一次没用完，未用的孔是密封在4℃的（这个是按说明书），实验时随意安置在架子上，所以不应该是试剂盒材料出了问题。
但样品是跟第一次一样操作的，离心，冻存，解冻条件都一样。

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1楼 2014-08-12 10:55:52

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berniehuang

铁杆木虫 (正式写手)

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专业: 免疫生物学

引用回帖:

9楼: Originally posted by 逍潇 at 2014-08-14 10:36:21
IL-1beta和TNFalpha、IL-6都属于炎症因子，这类因子在空白小鼠血清或血浆中的含量是很低的，我用过eBioscience的ELISA盒子测BALB/C 血清的TNFalpha和IL-6都没测出来，用所谓的RD分装的国产盒子测出来有颜色，反正我 ...

R&D发表过声明，明确表示没有分装产品。所以所谓的R&D分装百分之百都是假货。