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shuyeechan

金虫 (小有名气)

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[求助] 安捷伦色谱柱长菌堵塞了怎么办已有10人参与

之前一直用安捷伦短柱 4.6*100,3.5um跑标准品
流动相是乙腈：水=20:80
有段时间没用它，也没有去冲柱子
现在柱压是之前的一倍

排除了仪器其他地方堵塞
确定是柱子的问题
估计是长期处于高水相所以长菌了
工程师建议90%水0.1ml/min冲洗
我冲了一天了压力没有变化

求教各位虫友有没有好办法
柱子用过不超过10次
跑的标准品也很纯不会是杂质
不敢反冲柱子毕竟是新柱
求助求助

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1楼2014-07-21 17:01:20

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bjf180702050

金虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

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shuyeechan: 金币+3, ★有帮助 2014-08-06 09:12:42

按照现在的柱子的装填技术，基本已经不存在装填不均匀的情况了，所以反冲是可以，就是流速要低，0.1，0.2，0.5一点一点地加上去(不要接检测器，这不用说了吧），这样子可以排除物理上的可能部分堵塞。
如果反冲情况不好，可以尝试把柱前筛板拆下来加热超声清洗（不用两面都清洗，如果柱后都堵了，基本就不用折腾了，换柱子吧），但是千万注意别把柱前的填料损失了，一旦出现柱流失，这柱子基本废了，峰展宽会很严重。
拆下柱前筛板以后注意下正反面的情况，虽然agilent柱子的筛板是没有正反的，但是考虑到你可能柱前筛板是脏了，所以在不能保证清洗干净的情况，不要把原本就脏了的一面装到贴紧填料的一面。
以上是去除物理上的堵塞。
不知道你是用的agilent的哪个系列的柱子，虽然目前主流的柱子走纯水是可以的，但是还是不推荐的。冲洗的溶剂，基本就是水，甲醇，乙腈，如果还是不行，就用IPA（粘度很大，流速要小，大流速会冲塌柱子的）。
最后就是以后柱子用纯甲醇保存，不要用乙腈，会聚合的。