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丫头7976

铜虫 (正式写手)

[求助] 关于真核生物基因载体构建内含子的问题 已有2人参与

请教大家一个问题,还没接触过真核基因方面的载体构建,大家都知道真核生物基因不像原核生物的基因是连续的,真核生物基因被内含子间隔,那么在扩增一个蛋白的目的基因过程中就是把内含子也扩进去了是吗?假如我的目的蛋白是300个氨基酸,那么我的目的基因片段因为内含子的存在远远大于1200bp是么?求指教,小弟基础不太好,勿见笑!
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zhxl0

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流! 2014-06-28 23:00:11
丫头7976: 金币+8, ★★★★★最佳答案 2014-06-29 10:16:50
应该提取真核生物的RNA,把mRNA逆转录成cDNA,最后PCR扩增,这样内含子就去掉了
5楼2014-06-28 15:55:22
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查看全部 5 个回答

阿Q~~

至尊木虫 (文坛精英)

帮顶~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~
自强不息,厚德载物;独立精神,自由思想。
2楼2014-06-26 16:39:42
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Beryl_xu

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是的,不可能分几段扩增的啊。
3楼2014-06-27 09:52:01
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biology-girl

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-06-28 23:00:05
丫头7976: 金币+2 2014-06-29 10:20:31
当然要除去内含子啦,原核表达识别不了真菌的内含子。
4楼2014-06-28 15:02:37
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