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人胚肾细胞293培养求助 已有2人参与
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各位虫友，本人化学专业，之前没有培养过动物细胞，现在在培养人胚肾细胞293上给卡死了，希望大家能帮助一下，实在不知道怎样进行下去了。 这半个月由于论文需要，想培养人胚肾细胞293做金属形态学代谢研究，培养之前看了很多关于这种细胞的培养条件和方法，在论坛里也看了很多帖子，很多人说293细胞很容易培养，6-8小时就贴壁，并且确实有很多文献也指出了。但同时论坛里还有另外一半人指出了293细胞的贴壁性很差，细胞很娇贵，所以很难养，现在我也出现了同样的问题，细胞到目前4天了还是悬浮圆形的，极少数贴壁，并且细胞液久了就会也絮状物质产生，但是细胞数目一直在增加。不知道是什么原因让它贴壁这么难 下面我把培养的详细放在附件图片中和大家讲一下，希望大家能帮我出一下招，小弟很感激... 细胞在上海某生物买的，收到货后也按步骤操作，但就是不贴壁，三天后告诉卖家还不贴壁并且是圆形，并且发了图片给他，卖家很热心告诉细胞已经死了，于是就寄给我小瓶的细胞保护液，就是图23中的状态，这次我怕是培养瓶的问题，就用了不同品牌的，结果两天后，细胞还是圆形，如下图579，但是细胞公司坚持说他们培养这种细胞6小时差不多就会贴壁了，但是就是不知道到我这里就不贴了。 半个月过去了，我怀疑是细胞株的问题，决定换一家公司，于是就从我学校细胞库拿了一株，同时，我把我的培养基和培养瓶给了细胞库老师，他也同时分别用他的培养基和我的培养基，结果24小时候后，我在实验室培养的和这位老师培养的都没有贴壁，都呈圆形状。 现在我两天没去换液了，不知道明天又会怎样，这样下去单纯在这个细胞培养上就出现这种问题，压力好大啊，不知道这论文要到何时去了，还望有这方面经验的虫友提供帮助，谢谢大家了...  1.收到细胞时图1.JPG  3.收到细胞时-图3.JPG  4.收到细胞时-图4.JPG  5.6孔板培养24小时-大部分悬浮.JPG  6.6孔板培养.JPG  7.培养瓶1培养24小时-80%贴壁.JPG  8.培养瓶.JPG  9.康宁培养瓶培养24小时-70%贴壁.JPG  10.康宁培养瓶.JPG  11.培养皿培养24小时-几乎不贴壁.JPG  IMG_1220.JPG  培养液配制.png  全部贴壁的状态.JPG  三天前用康宁培养基-出现了梭形1.JPG  三天前用康宁培养基-出现了梭形2.JPG  实验器材.png |
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9楼2014-06-24 22:31:01
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jurkat.1640
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