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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 动物组织中RNA的提取
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xiashiyu1986

新虫 (小有名气)

[求助] 动物组织中RNA的提取已有9人参与

动物组织苗检测：疫苗来源是鸡胚和脾脏，剪碎、冻干后用PBS溶解，6000r/min离心5min，上清用试剂盒提取RNA，扩增后无条带。引物没问题，想请教组织中RNA应如何提取？手提时RNA有白色沉淀，这白色沉淀是什么?
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1楼2014-06-18 09:56:06
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★
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xiashiyu1986(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-18 10:44:11
蛋白质。
建议你加一步蛋白质纯化就哦了，或者溶解RNA后，离心取上清即得。
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
3楼2014-06-18 10:26:12
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grase

捐助贵宾 (职业作家)

【答案】应助回帖

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★
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xiashiyu1986(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-18 10:44:05
白色沉淀是蛋白。
如果上清，RNA量非常少，检测不出正常。
如果是提取组织，应该是液氮研磨后加裂解液才可以。
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2楼2014-06-18 10:10:09
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这样都不降解RNA那太没天理了
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4楼2014-06-18 16:49:02
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xv1215

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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xiashiyu1986(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-06-20 10:44:19
全降解了，组织提取rna实验条件跟苛刻，必须严格要求，液氮研磨是必须的，此外用的手术器械，研铂等都需要180度高温去除RNA酶的，另外提完要测OD值电泳测质量，建议提完马上反转，否则负80保存

[ 发自小木虫客户端 ]
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5楼2014-06-18 17:12:02
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