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双向电泳提取蛋白质的方法 已有2人参与
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我是最近才开始做双向电泳的，做了几次效果都不理想。分析主要原因是提取蛋白时蛋白损失过多。现在求助大家是否提蛋白较好的方法。 我主要做的标本是组织还有细胞 处理细胞的方法： 1.用PBS洗细胞3次。 2.加入裂解液4℃裂解25min(裂解液 7M尿素，2M硫脲 ，4%DTT，CHAPS 4-5ul) 3.冰上超声破碎10min 4.4℃ 14000rpm 离心10in 5.取部分上清测定蛋白浓度、 组织的提取方法 本人觉得不大好，就不写出来了。 希望大家能多给我提供几种提蛋白的方法，最好是做双向电泳时用的提蛋白的方法。 |
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