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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 酶动力学实验
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cupdandan520

铁虫 (初入文坛)

[求助] 酶动力学实验 已有1人参与

最近做酶活测定实验，想请教一下各位大侠，酶动力学分析应该怎样设定底物浓度？酶液必须要纯化吗？我的实验是有机磷降解酶，底物是甲基对硫磷（MP），采用分光光度计测定产物对硝基苯酚（PNP）的吸光度，根据PNP标准曲线算出对应的浓度。进而算出酶活力。现在想绘制酶动力学曲线，但是底物的浓度不太清楚怎样设定。
这一块实验，我刚刚接触，很多内容了解不够深入，之前对这一块也没有太多兴趣，不清楚别的女生是不是很擅长这一块， 我对酶学这一块有点糊里糊涂，总是弄不清楚概念。初出茅庐，希望大家尽可能给予帮助，万分感谢！
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1楼 2014-06-06 11:47:12
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cupdandan520

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-06 13:43:33
You will need to make a standard curve at the beginning by a standard enzyme from company like sigma, or by the decrease of substrate or increase of product.
The concentration of substrate should be ...

谢谢您的回复。实验还在进行中，我会寻求解决问题的办法
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3楼2014-06-08 10:21:03
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-06-06 17:25:13
You will need to make a standard curve at the beginning by a standard enzyme from company like sigma, or by the decrease of substrate or increase of product.
The concentration of substrate should be set to maximum, which together with temperature and reaction time so on and so on, need to be set before your final experiment

If you never did this experiment, it is better off to find someone else to help you
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
2楼2014-06-06 13:43:33
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