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KEVIN_LOVE

木虫 (正式写手)

[求助] pCDNA3.1载体中Kozak序列的问题 已有1人参与

我现在正在做某个基因的过表达,用的过表达载体是pCDNA3.1。引物设计时,并未在起始密码子处开始设计,而是在ATG上游前40碱基左右开始设计的。但是今天师兄告诉我pCDNA3.1一定要加Kozak序列才行。而且Kozak序列应该为gccaccATGg,可是我看我扩增出来的序列为cccaggATGg,然后我又查了pCDNA3.1的说明书,上面建议的Kozak序列为:(G/A)NNATGG,NN的意思是不是可以为任意碱基?但是我上网查后,很多网友都说Kozak序列应该为gccaccATGg,所以我很头疼,我扩增出的序列与说明书中的相符合,但是与师兄和网友们说的不一致,所以我很头疼。因此想问各位我扩增出来的序列可以直接连接到pCDNA3.1上直接做过表达吗?
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yipan

铜虫 (职业作家)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
个人认为没有问题,只要与说明书吻合即可。
2楼2014-06-05 15:11:06
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