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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pCDNA3.1载体中Kozak序列的问题
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KEVIN_LOVE

木虫 (正式写手)

[求助] pCDNA3.1载体中Kozak序列的问题 已有1人参与

我现在正在做某个基因的过表达，用的过表达载体是pCDNA3.1。引物设计时，并未在起始密码子处开始设计，而是在ATG上游前40碱基左右开始设计的。但是今天师兄告诉我pCDNA3.1一定要加Kozak序列才行。而且Kozak序列应该为gccaccATGg，可是我看我扩增出来的序列为cccaggATGg，然后我又查了pCDNA3.1的说明书，上面建议的Kozak序列为：(G/A)NNATGG，NN的意思是不是可以为任意碱基？但是我上网查后，很多网友都说Kozak序列应该为gccaccATGg，所以我很头疼，我扩增出的序列与说明书中的相符合，但是与师兄和网友们说的不一致，所以我很头疼。因此想问各位我扩增出来的序列可以直接连接到pCDNA3.1上直接做过表达吗？
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1楼 2014-06-05 13:10:50
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yipan

铜虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
个人认为没有问题，只要与说明书吻合即可。
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2楼2014-06-05 15:11:06
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