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鸦米

新虫 (小有名气)

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[交流] 有人在做BiFC吗？已有16人参与

因为我近期要做BiFC,我们实验室之前没有人做过，所以想请教曾经做过的朋友一些问题，哪位做过可以交流一下吗？

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1楼 2014-06-04 11:54:13

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starseacow

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西门吹雪170: 金币+3, 应助指数+1, 鼓励回帖交流 2014-06-07 10:10:13

引用回帖:

7楼: Originally posted by sarah-miao at 2014-06-05 17:09:05
您好，我想咨询下你手上的BIFC系统的阴性对照和阳性对照在正常转染情况下是否都存在荧光情况，另外您用来最后肯定两者存在相互作用是否是根据荧光蛋白的比例来衡量的还是其他的方法？之前做这方面的实验一直不是很 ...

有背景荧光干扰很正常，有时候尤其是做拟南芥根，什么都不赚转植物本身也有一定的荧光信号。我们的做法是建立了一个rBiFC系统，在载体上单独加上了一个RFP，这样可以依靠RFP信号检查农杆菌侵染转化效果，并用YFP／RFP比值表示结果，同时，添加一定的tag以便做western检查表达水平。结合这些手段，可以有效抑制干扰并获得可信结果。具体可以参考上面列出的文章。

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