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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 为什么我做BiFC的时候用DAPI染核在高倍镜下面显示的细胞核不是圆的？
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lw0105jay

金虫 (小有名气)

[求助] 为什么我做BiFC的时候用DAPI染核在高倍镜下面显示的细胞核不是圆的？ 已有6人参与

这是正常的么？还是怎么回事 ？
为什么我做BiFC的时候用DAPI染核在高倍镜下面显示的细胞核不是圆的？
Image0015_Z001.jpg
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1楼 2014-01-20 22:19:00
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DAX1

新虫 (小有名气)
★ ★
lw0105jay(kx444555代发): 金币+2, 鼓励交流 2014-01-21 09:27:44
细胞核可以是椭圆得，不规则地椭圆得，我还没见过真正圆得细胞核，不过楼主得图我看不懂
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2楼2014-01-20 22:40:39
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Davidzjy

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lw0105jay(kx444555代发): 金币+3, 鼓励交流 2014-01-21 09:27:50
我觉得已经很圆了
有可能是因为核质分布不均匀导致的视觉差异
毕竟未经染色是看不见实体膜的
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3楼2014-01-21 08:46:01
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2014-01-25 16:14:33
显然是杂质的着色，细胞中的细胞核没有着色
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4楼2014-01-21 10:51:08
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percoll

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2014-01-25 16:15:20
从照片上来看，应该不是细胞核，而是其它杂质，楼主可能没有将焦距调到细胞上。
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5楼2014-01-21 14:14:29
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kchbio

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-25 16:16:09
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-25 16:16:25
你这是非特异染色，染的是杂质。是不是DAPI过期或者太稀了？建议你用贴壁细胞作为阳性对照 （比如MEF，在phase下能清楚看见细胞核）试染色条件，比如DAPI 的浓度。同时用PI 作为染料的阳性对照。
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6楼2014-01-22 07:54:28
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
杂质，没有人帮你把关么

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2014-01-22 12:23:34
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mzq98920

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-25 16:16:53
1 你的细胞染色根本就没有成功，图中亮点可能是你的染料没有洗干净。
2 你的细胞都凋亡了……
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有机合成+荧光分析
8楼2014-01-25 12:28:46
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lw0105jay

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by kchbio at 2014-01-22 07:54:28
你这是非特异染色，染的是杂质。是不是DAPI过期或者太稀了？建议你用贴壁细胞作为阳性对照 （比如MEF，在phase下能清楚看见细胞核）试染色条件，比如DAPI 的浓度。同时用PI 作为染料的阳性对照。

图中细胞里面的亮点确实是细胞核，通过confocal扫整个细胞可以看出来，只不过这个细胞的细胞核不在细胞的正中间，所以聚焦到细胞核的时候感觉整个细胞的轮廓是模糊的。我只是好奇说这个细胞核的形态太奇怪了！楼下有人说是凋亡了，我不知道是是不是指这个细胞核萎缩了！
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9楼2014-03-15 17:50:47
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lw0105jay

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by mzq98920 at 2014-01-25 12:28:46
1 你的细胞染色根本就没有成功，图中亮点可能是你的染料没有洗干净。
2 你的细胞都凋亡了……

细胞凋亡了？怎么说？
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10楼2014-03-15 17:51:16
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