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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒DNA快速提取方法与步骤
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ruchang2013

铁虫 (初入文坛)

[求助] 质粒DNA快速提取方法与步骤

挑菌落进行质粒提取验证的时候，由于菌落多，用试剂盒太浪费，有什么比较简单的方法与步骤吗？我们实验室有酚/氯仿/异戊醇（25:24:1）。但我提pTKIP-cat与2.5kb的核算片段重组，利用此材料进行块提，没有质粒。mark5kb。请问大家有什么好方法或步骤吗？或者您用酚/氯仿/异戊醇提取的步骤是什么？

质粒DNA快速提取方法与步骤
2014.0530 快速质粒文献方法.png
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1楼 2014-05-31 14:49:38
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li123h

铜虫 (初入文坛)
那就方便了，从多克隆位点两边设计引物，或者直接找你载体的通用测序引物，菌落PCR。
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4楼2014-05-31 19:38:12
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li123h

铜虫 (初入文坛)
不知道你的验证目的是什么。要是你能在你的质粒上选出特异性的序列，进行PCR扩增，你就会幸运好多了。
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2楼2014-05-31 15:04:24
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ruchang2013

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by li123h at 2014-05-31 15:04:24
不知道你的验证目的是什么。要是你能在你的质粒上选出特异性的序列，进行PCR扩增，你就会幸运好多了。

就是验证片段有没有重组到载体上啊，重组成功当然条带是大一些啦
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3楼2014-05-31 17:59:51
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