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demonsboy

金虫 (小有名气)

[求助] 求助酶联免疫的问题 已有5人参与

本人在做一种双抗体夹心法试剂盒,评估一对抗体时,采用抗体直接包板捕捉抗原显示,两种配对抗体可用,而借助亲和素包板,吸附生物素标记抗体,尔后再检测抗原时,这对抗体检测临床抗原效果却特别不理想,请问在这种情况下,调节反应缓冲液,可以解决问题吗,还是这对抗体本身不适合于亲和素间接包板,求大侠支招
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

有做过空白对照吗?有些抗原或者抗体能够绕过封闭剂直接吸附在酶标板条上了,把个试剂的空白对照做全找找原因,特别是不包被亲和素但是封闭的空白板条对照
9楼2016-11-16 17:28:27
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hbl215

金虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
确定生物素标记抗体通过亲和素包被于板上?我猜是这步的问题,生物素分子量小,因为空间位阻作用,生物素与亲和素没有结合,导致捕获抗体并没有结合于板上,因此你后面效果也不好啦。
2楼2014-05-28 12:22:59
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demonsboy

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hbl215 at 2014-05-28 12:22:59
确定生物素标记抗体通过亲和素包被于板上?我猜是这步的问题,生物素分子量小,因为空间位阻作用,生物素与亲和素没有结合,导致捕获抗体并没有结合于板上,因此你后面效果也不好啦。

如果是这样的话,那应该所有的样本都检不出才对,而我的实验结果是有的临床可以检出,而有的却不行,谢谢~
3楼2014-05-29 15:48:59
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hbl215

金虫 (文坛精英)

呃。。,是这样结果的话,那我就不知道了,或者是有些样品的抗原表位被包在亲和素链里,哈哈,瞎想的,等高手解答,我也学习一下。
4楼2014-05-29 16:31:08
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