应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 环境 » 交流探讨 » 请问如何用荧光显微镜观察甲烷菌？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 2471  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

happyer0

铜虫 (小有名气)

[求助] 请问如何用荧光显微镜观察甲烷菌？ 已有1人参与

看文献说甲烷菌内有辅酶F420，在420nm波长的入射光激发下发射出470nm波长的荧光， 是不是要在紫外滤光片下才能直接观察到发荧光的甲烷菌？是活菌才有荧光吗？用另两片（红色和黄色）能不能看到？能不能拿厌氧发酵液直接在荧光下观察？
另外再请问荧光显微镜三个滤光片，是根据什么情况选用？在环境微生物实验中一般哪两个滤光片用得较多？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

环境

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-05-22 12:12:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happyer0

铜虫 (小有名气)
★ ★
vaughn: 金币+2, 以学术交流的思想来发帖，并给出别人的回复，非常好 2014-05-25 07:08:37
因为着急解决这个问题，在微生物版块上先发了求助帖，收到 liujianmin68的 回复：1. 甲烷菌是有辅酶F420，且能用荧光显微镜观察到荧光。420nm下有荧光激发出，所以应该选择紫外滤光片观察，你描述的没错。
2. 是活菌才能观察，并且因为甲烷菌是严格厌氧菌，所以观察过程尽可能快些，活的甲烷菌能发荧光，但在观察过程中，能看到荧光强度一直在减弱。所以，想取得较好的观察效果，最好在几分钟内完成。
3. 可以取发酵液直接观察，甲烷菌较小，单个菌的荧光较弱，所以，我们观察时，一般用40倍物镜，观察群体的荧光。
4. 其它的滤光片颜色激发波长有直接的关系，在细胞生物学研究中，有红色、绿色、黄色等不同的荧光标记，这时候就可以用不同的荧光滤片了。

考虑到可能有些人也不明白，所以将以上回答贴于此。
赞一下 回复此楼
6楼2014-05-23 11:27:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

刘兵

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
happyer0: 金币+1, ★有帮助 2014-05-22 12:38:29
xuweimbf: 金币+1, 积极应助 2014-05-22 17:19:13
您的实验目的是什么？是要看甲烷菌的死活情况还是其他的目的？
滤片的目的是选择一定范围的波长，然后咱们人眼可以观测得到。
关于滤片的选择和用途建议你看看荧光显微镜的产品说明书就可以，上面有介绍。
如果是Live/dead staining 的话，需要加 染剂，然后观测。
甲烷菌我没有做过，我只做过 Nitrifying bacterial staining.
赞一下 回复此楼
永远爱老婆！
2楼2014-05-22 12:33:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happyer0

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 刘兵 at 2014-05-22 12:33:02
您的实验目的是什么？是要看甲烷菌的死活情况还是其他的目的？
滤片的目的是选择一定范围的波长，然后咱们人眼可以观测得到。
关于滤片的选择和用途建议你看看荧光显微镜的产品说明书就可以，上面有介绍。
如果是 ...

谢谢您的回复。我是想看看厌氧培养液里面到底有没有甲烷菌。因为培养很久了，也看到液体里有气泡出现，但是似乎没有多少的产气量。
实验室里用的是尼康荧光显微镜，我对荧光这滤光片作用不太了解，因为看文献上说的是辅酶F420，在420nm波长的入射光激发下发射出470nm波长的荧光，而一个滤光片是在450-490nm的，而紫外滤光片应该在450nm以下，可是我们刚好缺这紫外的，所以我不知道是要在哪一个波段下观察甲烷菌才好，因此才有上述问题。
赞一下 回复此楼
3楼2014-05-22 12:45:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘兵

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by happyer0 at 2014-05-22 13:45:32
谢谢您的回复。我是想看看厌氧培养液里面到底有没有甲烷菌。因为培养很久了，也看到液体里有气泡出现，但是似乎没有多少的产气量。
实验室里用的是尼康荧光显微镜，我对荧光这滤光片作用不太了解，因为看文献上说 ...

1.产甲烷菌的种类众多，因基质和反应条件不同也会呈现出不同的种类分布，外形规则也有 不规则球星 杆状 短杆状 链球状等等。目前常用的检测方法应该是 PCR-DGGE。
2.液体气泡产生不一定就是甲烷，也可能是CO2。 如果可能的话 何不用气相色谱先走个样看看是否有甲烷气体存在，然后再做下一步计划。毕竟显微镜的误差比较大。
3.在甲烷菌分子生物学中，日本东北大学的李玉友老师做的不错，您可以看看他实验室的文章。
赞一下 回复此楼
永远爱老婆！
4楼2014-05-22 14:54:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 291求调剂 +12 hhhhxn.. 2026-03-23 18/900 2026-03-27 17:41 by ditto77778
[考研] 265求调剂 +5 小木虫085600 2026-03-27 5/250 2026-03-27 17:34 by 红玉佳人
[考研] 340求调剂 +4 jhx777 2026-03-27 4/200 2026-03-27 16:50 by sanrepian
[考研] 292求调剂 +13 鹅鹅鹅额额额额� 2026-03-25 14/700 2026-03-27 15:40 by caszguilin
[考研] 安徽大学专硕生物与医药专业(086000)324分，英语已过四六级，六级521，求调剂 +4 美味可乐鸡翅 2026-03-26 4/200 2026-03-27 15:27 by 星空星月
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学材料与化工方向336分 +4 辰沐5211314 2026-03-26 4/200 2026-03-27 15:21 by 星空星月
[考研] 0856，材料与化工321分求调剂 +4 大馋小子 2026-03-27 4/200 2026-03-27 13:07 by yhmsz
[考研] 调剂推荐 +5 清酒714 2026-03-26 6/300 2026-03-27 11:12 by 不吃魚的貓
[论文投稿] Journal of Mechanical Science and Technology +3 Russ_ss 2026-03-25 5/250 2026-03-27 10:49 by 陆小果画大饼
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-27 07:58 by chemisry
[考研] 336材料求调剂 +7 陈滢莹 2026-03-26 9/450 2026-03-27 00:20 by wxiongid
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +4 钢铁大炮 2026-03-24 4/200 2026-03-26 16:28 by dick_runner
[考研] 打过很多竞赛，085406控制工程300分，求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 6/300 2026-03-23 21:45 by 子系博
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭