应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 环境 » 交流探讨 » 请问如何用荧光显微镜观察甲烷菌？
61/1返回列表
查看: 2446  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

happyer0

铜虫 (小有名气)

[求助] 请问如何用荧光显微镜观察甲烷菌？ 已有1人参与

看文献说甲烷菌内有辅酶F420，在420nm波长的入射光激发下发射出470nm波长的荧光， 是不是要在紫外滤光片下才能直接观察到发荧光的甲烷菌？是活菌才有荧光吗？用另两片（红色和黄色）能不能看到？能不能拿厌氧发酵液直接在荧光下观察？
另外再请问荧光显微镜三个滤光片，是根据什么情况选用？在环境微生物实验中一般哪两个滤光片用得较多？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

环境

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-05-22 12:12:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘兵

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
happyer0: 金币+1, ★有帮助 2014-05-22 12:38:29
xuweimbf: 金币+1, 积极应助 2014-05-22 17:19:13
您的实验目的是什么？是要看甲烷菌的死活情况还是其他的目的？
滤片的目的是选择一定范围的波长，然后咱们人眼可以观测得到。
关于滤片的选择和用途建议你看看荧光显微镜的产品说明书就可以，上面有介绍。
如果是Live/dead staining 的话，需要加 染剂，然后观测。
甲烷菌我没有做过，我只做过 Nitrifying bacterial staining.
赞一下 回复此楼
永远爱老婆！
2楼2014-05-22 12:33:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happyer0

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 刘兵 at 2014-05-22 12:33:02
您的实验目的是什么？是要看甲烷菌的死活情况还是其他的目的？
滤片的目的是选择一定范围的波长，然后咱们人眼可以观测得到。
关于滤片的选择和用途建议你看看荧光显微镜的产品说明书就可以，上面有介绍。
如果是 ...

谢谢您的回复。我是想看看厌氧培养液里面到底有没有甲烷菌。因为培养很久了，也看到液体里有气泡出现，但是似乎没有多少的产气量。
实验室里用的是尼康荧光显微镜，我对荧光这滤光片作用不太了解，因为看文献上说的是辅酶F420，在420nm波长的入射光激发下发射出470nm波长的荧光，而一个滤光片是在450-490nm的，而紫外滤光片应该在450nm以下，可是我们刚好缺这紫外的，所以我不知道是要在哪一个波段下观察甲烷菌才好，因此才有上述问题。
赞一下 回复此楼
3楼2014-05-22 12:45:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘兵

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by happyer0 at 2014-05-22 13:45:32
谢谢您的回复。我是想看看厌氧培养液里面到底有没有甲烷菌。因为培养很久了，也看到液体里有气泡出现，但是似乎没有多少的产气量。
实验室里用的是尼康荧光显微镜，我对荧光这滤光片作用不太了解，因为看文献上说 ...

1.产甲烷菌的种类众多，因基质和反应条件不同也会呈现出不同的种类分布，外形规则也有 不规则球星 杆状 短杆状 链球状等等。目前常用的检测方法应该是 PCR-DGGE。
2.液体气泡产生不一定就是甲烷，也可能是CO2。 如果可能的话 何不用气相色谱先走个样看看是否有甲烷气体存在，然后再做下一步计划。毕竟显微镜的误差比较大。
3.在甲烷菌分子生物学中，日本东北大学的李玉友老师做的不错，您可以看看他实验室的文章。
赞一下 回复此楼
永远爱老婆！
4楼2014-05-22 14:54:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happyer0

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 刘兵 at 2014-05-22 14:54:58
1.产甲烷菌的种类众多，因基质和反应条件不同也会呈现出不同的种类分布，外形规则也有 不规则球星 杆状 短杆状 链球状等等。目前常用的检测方法应该是 PCR-DGGE。
2.液体气泡产生不一定就是甲烷，也可能是CO2。 如 ...

谢谢您的指点！
回复此楼
5楼2014-05-22 16:12:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happyer0

铜虫 (小有名气)
★ ★
vaughn: 金币+2, 以学术交流的思想来发帖，并给出别人的回复，非常好 2014-05-25 07:08:37
因为着急解决这个问题，在微生物版块上先发了求助帖，收到 liujianmin68的 回复：1. 甲烷菌是有辅酶F420，且能用荧光显微镜观察到荧光。420nm下有荧光激发出，所以应该选择紫外滤光片观察，你描述的没错。
2. 是活菌才能观察，并且因为甲烷菌是严格厌氧菌，所以观察过程尽可能快些，活的甲烷菌能发荧光，但在观察过程中，能看到荧光强度一直在减弱。所以，想取得较好的观察效果，最好在几分钟内完成。
3. 可以取发酵液直接观察，甲烷菌较小，单个菌的荧光较弱，所以，我们观察时，一般用40倍物镜，观察群体的荧光。
4. 其它的滤光片颜色激发波长有直接的关系，在细胞生物学研究中，有红色、绿色、黄色等不同的荧光标记，这时候就可以用不同的荧光滤片了。

考虑到可能有些人也不明白，所以将以上回答贴于此。
赞一下 回复此楼
6楼2014-05-23 11:27:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 happyer0 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料284求调剂，一志愿郑州大学英一数二专硕 +10 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:12 by yc258
[考研] 0805总分292，求调剂 +3 幻想之殇 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:11 by yc258
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +3 15779376950 2026-03-01 3/150 2026-03-01 13:47 by ALZOOZL
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +4 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 4/200 2026-03-01 13:15 by wang_dand
[考研] 0856化工专硕求调剂 +6 董boxing 2026-03-01 6/300 2026-03-01 12:45 by houyaoxu
[考研] 272求调剂 +5 材紫有化 2026-02-28 5/250 2026-03-01 11:51 by gaoxiaoniuma
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +3 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 6/300 2026-03-01 11:50 by gaoxiaoniuma
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[考研] 0856求调剂285 +6 吕仔龙 2026-02-28 6/300 2026-03-01 10:03 by wang_dand
[考研] 298求调剂 +5 axyz3 2026-02-28 5/250 2026-03-01 06:45 by 刘兵
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 化工专硕348，一志愿985求调剂 +4 弗格个 2026-02-28 6/300 2026-02-28 22:00 by wang_dand
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[考研] 295求调剂 +5 19171856320 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:39 by gaoxiaoniuma
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭