应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 环境 » 交流探讨 » 请问如何用荧光显微镜观察甲烷菌？
汕头大学海洋科学接受调剂
61/1返回列表
查看: 2494  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

happyer0

铜虫 (小有名气)

[求助] 请问如何用荧光显微镜观察甲烷菌？ 已有1人参与

看文献说甲烷菌内有辅酶F420，在420nm波长的入射光激发下发射出470nm波长的荧光， 是不是要在紫外滤光片下才能直接观察到发荧光的甲烷菌？是活菌才有荧光吗？用另两片（红色和黄色）能不能看到？能不能拿厌氧发酵液直接在荧光下观察？
另外再请问荧光显微镜三个滤光片，是根据什么情况选用？在环境微生物实验中一般哪两个滤光片用得较多？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

环境

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-05-22 12:12:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘兵

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
happyer0: 金币+1, ★有帮助 2014-05-22 12:38:29
xuweimbf: 金币+1, 积极应助 2014-05-22 17:19:13
您的实验目的是什么？是要看甲烷菌的死活情况还是其他的目的？
滤片的目的是选择一定范围的波长，然后咱们人眼可以观测得到。
关于滤片的选择和用途建议你看看荧光显微镜的产品说明书就可以，上面有介绍。
如果是Live/dead staining 的话，需要加 染剂，然后观测。
甲烷菌我没有做过，我只做过 Nitrifying bacterial staining.
赞一下 回复此楼
永远爱老婆！
2楼2014-05-22 12:33:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happyer0

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 刘兵 at 2014-05-22 12:33:02
您的实验目的是什么？是要看甲烷菌的死活情况还是其他的目的？
滤片的目的是选择一定范围的波长，然后咱们人眼可以观测得到。
关于滤片的选择和用途建议你看看荧光显微镜的产品说明书就可以，上面有介绍。
如果是 ...

谢谢您的回复。我是想看看厌氧培养液里面到底有没有甲烷菌。因为培养很久了，也看到液体里有气泡出现，但是似乎没有多少的产气量。
实验室里用的是尼康荧光显微镜，我对荧光这滤光片作用不太了解，因为看文献上说的是辅酶F420，在420nm波长的入射光激发下发射出470nm波长的荧光，而一个滤光片是在450-490nm的，而紫外滤光片应该在450nm以下，可是我们刚好缺这紫外的，所以我不知道是要在哪一个波段下观察甲烷菌才好，因此才有上述问题。
赞一下 回复此楼
3楼2014-05-22 12:45:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘兵

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by happyer0 at 2014-05-22 13:45:32
谢谢您的回复。我是想看看厌氧培养液里面到底有没有甲烷菌。因为培养很久了，也看到液体里有气泡出现，但是似乎没有多少的产气量。
实验室里用的是尼康荧光显微镜，我对荧光这滤光片作用不太了解，因为看文献上说 ...

1.产甲烷菌的种类众多，因基质和反应条件不同也会呈现出不同的种类分布，外形规则也有 不规则球星 杆状 短杆状 链球状等等。目前常用的检测方法应该是 PCR-DGGE。
2.液体气泡产生不一定就是甲烷，也可能是CO2。 如果可能的话 何不用气相色谱先走个样看看是否有甲烷气体存在，然后再做下一步计划。毕竟显微镜的误差比较大。
3.在甲烷菌分子生物学中，日本东北大学的李玉友老师做的不错，您可以看看他实验室的文章。
赞一下 回复此楼
永远爱老婆！
4楼2014-05-22 14:54:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happyer0

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 刘兵 at 2014-05-22 14:54:58
1.产甲烷菌的种类众多，因基质和反应条件不同也会呈现出不同的种类分布，外形规则也有 不规则球星 杆状 短杆状 链球状等等。目前常用的检测方法应该是 PCR-DGGE。
2.液体气泡产生不一定就是甲烷，也可能是CO2。 如 ...

谢谢您的指点！
回复此楼
5楼2014-05-22 16:12:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happyer0

铜虫 (小有名气)
★ ★
vaughn: 金币+2, 以学术交流的思想来发帖，并给出别人的回复，非常好 2014-05-25 07:08:37
因为着急解决这个问题，在微生物版块上先发了求助帖，收到 liujianmin68的 回复：1. 甲烷菌是有辅酶F420，且能用荧光显微镜观察到荧光。420nm下有荧光激发出，所以应该选择紫外滤光片观察，你描述的没错。
2. 是活菌才能观察，并且因为甲烷菌是严格厌氧菌，所以观察过程尽可能快些，活的甲烷菌能发荧光，但在观察过程中，能看到荧光强度一直在减弱。所以，想取得较好的观察效果，最好在几分钟内完成。
3. 可以取发酵液直接观察，甲烷菌较小，单个菌的荧光较弱，所以，我们观察时，一般用40倍物镜，观察群体的荧光。
4. 其它的滤光片颜色激发波长有直接的关系，在细胞生物学研究中，有红色、绿色、黄色等不同的荧光标记，这时候就可以用不同的荧光滤片了。

考虑到可能有些人也不明白，所以将以上回答贴于此。
赞一下 回复此楼
6楼2014-05-23 11:27:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 happyer0 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 279求调剂 +11 张番茄不炒蛋 2026-04-11 11/550 2026-04-13 22:25 by zhq0425
[考研] 300分求调剂 （085501机械专硕，本科扬大） +8 xu@841019 2026-04-11 9/450 2026-04-13 21:36 by xu@841019
[考研] 272分材料子求调剂 +41 Loy0361 2026-04-10 53/2650 2026-04-13 14:20 by 张zhihao
[考研] 材料299专硕求调剂 +13 +21 2026-04-09 13/650 2026-04-13 14:16 by 张zhihao
[考研] 314求调剂 +24 wakeluofu 2026-04-09 25/1250 2026-04-13 08:58 by lhj2009
[考研] 电气专硕320求调剂 +6 小麻子111 2026-04-10 6/300 2026-04-12 10:54 by lemon6009
[考研] 277 数一104，学硕，求调剂 +21 瓶子PZ 2026-04-09 23/1150 2026-04-11 23:12 by labixiaoqiao
[考研] 343求调剂 +9 王国帅 2026-04-10 9/450 2026-04-11 20:31 by dongdian1
[考研] 本人女孩 +7 吼吼， 2026-04-10 9/450 2026-04-11 14:45 by ACS Nano——
[考研] 085501机械专硕 302分 不挑专业求调剂 +7 汪某. 2026-04-09 7/350 2026-04-11 14:37 by luhong1990
[考研] 283求调剂，工科！ +12 苏打水7777 2026-04-08 12/600 2026-04-11 10:28 by 逆水乘风
[考研] 298求调剂 +9 钉叮咚冬瓜 2026-04-07 11/550 2026-04-11 09:35 by zhq0425
[考研] 085404 298分求调剂 +10 呼啦呼啦呼呼呼 2026-04-10 11/550 2026-04-10 16:44 by wangy0907
[考研] 本科211 工科085400 280分求调剂 可跨专业 +3 LZH（等待调剂中 2026-04-09 3/150 2026-04-09 21:29 by wutongshun
[考研] 求机械专硕297第二批调剂 +5 拾柒12。 2026-04-08 5/250 2026-04-09 16:43 by 允当适度
[考研] 286求调剂 +19 Faune 2026-04-08 20/1000 2026-04-09 08:36 by 哦哦123
[考研] 生物学328分求调剂 +9 闪电kkl 2026-04-08 10/500 2026-04-08 21:42 by liuhuiying09
[考研] 388求调剂 +6 四川王涛 2026-04-07 8/400 2026-04-08 00:17 by JourneyLucky
[考研] 313求调剂 +3 十六拾陆 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:20 by lbsjt
[考研] 307求调剂 +3 Youth@@ 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:00 by hemengdong
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭