应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 求助如何利用HPLC 测定ATP 含量的问题
51/1返回列表
查看: 2955  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

chirstopher

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助如何利用HPLC 测定ATP 含量的问题 已有1人参与

各位研友：
             最近在做利用HPLC检测酵母菌的ATP含量的实验。样品中检测不出和标品相同时间的ATP出峰，不知道是什么原因。求助各位做过类似实验的前辈们指点，如能提供相关的方法文献，不胜感激。谢谢！

提取条件：TCA（三氯乙酸）做蛋白沉淀剂。  超声破碎细胞
流动条件：柱子：C18
             流动相：A 10nM 磷酸缓冲液（pH 6.5）
                               B 甲醇（100%）
              等度洗脱ATP
                         条件：0-10min    5%  甲醇
                                   10-20min   100%
                                   20-30min    5% （10min—30min为洗柱子和平衡过程，因为经查文献ATP一般在10分钟内出峰）


结果如图：红色为样品的检测结果，灰色为标品的检测结果，蓝色为标品和样品等体积混合结果。

求助如何利用HPLC 测定ATP 含量的问题
混合图.png
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-05-19 09:38:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chirstopher

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wolfman840 at 2014-05-21 12:54:34
是不是你的ATP浓度不对，造成洗脱时稀释，然后低于检测限了？

嗯，可能是个原因。我记得当时做的时候没有注意最低检测限度。国内做酵母ATP检测的少，多半都是发酵泥提取ATP，我们实验室是锥形瓶摇菌后，提取，所以感觉量会相对少些。请问你那边有什么好的提取方法建议吗？谢谢了。
赞一下 回复此楼
3楼2014-05-28 10:07:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是你的ATP浓度不对，造成洗脱时稀释，然后低于检测限了？
赞一下 回复此楼
2楼2014-05-21 12:54:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wolfman840

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by chirstopher at 2014-05-28 10:07:18
嗯，可能是个原因。我记得当时做的时候没有注意最低检测限度。国内做酵母ATP检测的少，多半都是发酵泥提取ATP，我们实验室是锥形瓶摇菌后，提取，所以感觉量会相对少些。请问你那边有什么好的提取方法建议吗？谢谢 ...

对于ATP的提取我没有好的办法，还是建议你查查文献吧。这个帮不了你呢
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2014-05-29 16:52:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

钴蓝星域

铜虫 (初入文坛)
亲，还在么？求问你买的标样是ATP的二钠盐，还是什么呀？
赞一下 回复此楼
喵？
5楼2015-04-23 13:05:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 4/200 2026-08-23 19:22 by lXgU0RvNTDC9
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 5/250 2026-08-23 19:10 by lXgU0RvNTDC9
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 07:41 by OEbVnUOu01ol
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 5/250 2026-08-23 04:07 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 4/200 2026-08-23 04:04 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:55 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 03:40 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:04 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 00:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭