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launol

铁虫 (小有名气)

[求助] 关于OPA-HPLC测定γ-氨基丁酸衍生化的问题

本人现在用OPA-HPLC法测定发酵液里GABA的含量，可是出来的峰连标准品都有好几个峰，而且还有些分不开，我不知道哪里出了问题，猜测可能是柱前衍生出了问题，现在想请教下各位做过OPA衍生的大侠，
1.柱前衍生的时间和温度对衍生化影响大吗？
2.另外OPA溶解不完全是不是对衍生影响很大？
3.我的样品衍生好后，时间变长颜色会变红，这是正常的吗？请各位指教！
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1楼 2012-08-21 22:36:47
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随时领金币

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
soundhorizo: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎常来分析版 ^^ 2012-08-22 11:07:17
我们是自动柱前衍生，样品衍生好后时间长了颜色好像也没有变化啊，我觉得你的样品预处理有没有处理好，蛋白类糖等物质去除了吗

为什么会出现OPA 溶解不完全呢？最好溶解完全吧


再想问一下，你们用的检测器是VWD?DAD?FLD?
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2楼2012-08-22 09:10:21
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jyp2002

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
launol: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-09-21 20:53:22
楼主是否是核对空白后标准品也出几个峰？有没有扣除衍生试剂的峰？
我以前做OPA衍生荧光检测的时候，衍生试剂也会出很多杂峰的，扣除杂峰就好了。
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3楼2012-08-22 14:40:33
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launol

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jyp2002 at 2012-08-22 14:40:33
楼主是否是核对空白后标准品也出几个峰？有没有扣除衍生试剂的峰？
我以前做OPA衍生荧光检测的时候，衍生试剂也会出很多杂峰的，扣除杂峰就好了。

恩。很有道理，我没扣除
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4楼2012-09-21 20:52:50
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sunzhiwei810910

金虫 (正式写手)
关于OPA-HPLC测定γ-氨基丁酸衍生化的问题,不止一个衍生物，是吗？这就对了。
看看八九十年代早期的文献，早有人讨论过了，是这样的。
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花儿努力地开
5楼2013-11-08 23:19:25
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朱珍

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 随时领金币 at 2012-08-22 09:10:21
我们是自动柱前衍生，样品衍生好后时间长了颜色好像也没有变化啊，我觉得你的样品预处理有没有处理好，蛋白类糖等物质去除了吗

为什么会出现OPA 溶解不完全呢？最好溶解完全吧


再想问一下，你们用的检测器是 ...

您好，想问您一下，你的OPA是怎么配置的，我配置的时候也出现了溶解不完全的情况，很苦恼，标曲做不出来
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6楼2014-04-03 15:14:13
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hu00zyp

新虫 (初入文坛)
内容已删除
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7楼2014-09-23 11:26:17
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ylx思轩

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 朱珍 at 2014-04-03 15:14:13
您好，想问您一下，你的OPA是怎么配置的，我配置的时候也出现了溶解不完全的情况，很苦恼，标曲做不出来...

亲，你的问题解决了吗？我的标曲也做不出来~~~
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8楼2015-09-06 20:56:03
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