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launol

铁虫 (小有名气)

[求助] 关于OPA-HPLC测定γ-氨基丁酸衍生化的问题

本人现在用OPA-HPLC法测定发酵液里GABA的含量,可是出来的峰连标准品都有好几个峰,而且还有些分不开,我不知道哪里出了问题,猜测可能是柱前衍生出了问题,现在想请教下各位做过OPA衍生的大侠,
1.柱前衍生的时间和温度对衍生化影响大吗?
2.另外OPA溶解不完全是不是对衍生影响很大?
3.我的样品衍生好后,时间变长颜色会变红,这是正常的吗?请各位指教!
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新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


soundhorizo: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎常来分析版 ^^ 2012-08-22 11:07:17
我们是自动柱前衍生,样品衍生好后时间长了颜色好像也没有变化啊,我觉得你的样品预处理有没有处理好,蛋白类糖等物质去除了吗

为什么会出现OPA 溶解不完全呢?最好溶解完全吧


再想问一下,你们用的检测器是VWD?DAD?FLD?
2楼2012-08-22 09:10:21
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jyp2002

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
launol: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-09-21 20:53:22
楼主是否是核对空白后标准品也出几个峰?有没有扣除衍生试剂的峰?
我以前做OPA衍生荧光检测的时候,衍生试剂也会出很多杂峰的,扣除杂峰就好了。
3楼2012-08-22 14:40:33
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launol

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jyp2002 at 2012-08-22 14:40:33
楼主是否是核对空白后标准品也出几个峰?有没有扣除衍生试剂的峰?
我以前做OPA衍生荧光检测的时候,衍生试剂也会出很多杂峰的,扣除杂峰就好了。

恩。很有道理,我没扣除
4楼2012-09-21 20:52:50
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sunzhiwei810910

金虫 (正式写手)

关于OPA-HPLC测定γ-氨基丁酸衍生化的问题,不止一个衍生物,是吗?这就对了。
看看八九十年代早期的文献,早有人讨论过了,是这样的。
花儿努力地开
5楼2013-11-08 23:19:25
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朱珍

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 随时领金币 at 2012-08-22 09:10:21
我们是自动柱前衍生,样品衍生好后时间长了颜色好像也没有变化啊,我觉得你的样品预处理有没有处理好,蛋白类糖等物质去除了吗

为什么会出现OPA 溶解不完全呢?最好溶解完全吧


再想问一下,你们用的检测器是 ...

您好,想问您一下,你的OPA是怎么配置的,我配置的时候也出现了溶解不完全的情况,很苦恼,标曲做不出来
6楼2014-04-03 15:14:13
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hu00zyp

新虫 (初入文坛)

内容已删除
7楼2014-09-23 11:26:17
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ylx思轩

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 朱珍 at 2014-04-03 15:14:13
您好,想问您一下,你的OPA是怎么配置的,我配置的时候也出现了溶解不完全的情况,很苦恼,标曲做不出来...

亲,你的问题解决了吗?我的标曲也做不出来~~~
8楼2015-09-06 20:56:03
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