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launol

铁虫 (小有名气)

[求助] 关于OPA-HPLC测定γ-氨基丁酸衍生化的问题

本人现在用OPA-HPLC法测定发酵液里GABA的含量,可是出来的峰连标准品都有好几个峰,而且还有些分不开,我不知道哪里出了问题,猜测可能是柱前衍生出了问题,现在想请教下各位做过OPA衍生的大侠,
1.柱前衍生的时间和温度对衍生化影响大吗?
2.另外OPA溶解不完全是不是对衍生影响很大?
3.我的样品衍生好后,时间变长颜色会变红,这是正常的吗?请各位指教!
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jyp2002

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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launol: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-09-21 20:53:22
楼主是否是核对空白后标准品也出几个峰?有没有扣除衍生试剂的峰?
我以前做OPA衍生荧光检测的时候,衍生试剂也会出很多杂峰的,扣除杂峰就好了。
3楼2012-08-22 14:40:33
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