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zuihuaying银虫 (小有名气)
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HPLC含量测定遇到的问题
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最近在做高液,在进对照品做标准曲线时刚开进样10uL,峰形很好且对称,当增大进样量到20uL时峰形变得很差,有点拖尾,再增加进样量到25uL时,峰形还是和20uL差不多,但是峰面积没增加多少,我的C对照品=0.540mg/ml,各进样量与峰面积如下所示: 进样量ul 4 6 8 10 15 20 25 28 峰面积 729012 1099891 1466323 1826574 2720422 3103343 3270460 3310054 我的A供1=1335431,A供2=3851411(进样量10uL),我想把供试品2包含到标准曲线的线性范围内,可是再增加进样量峰面积也没变化多少,是我的对照品浓度配稀了吗,还是需要把供试品2稀释,使A供试品2落在标准曲线以内,计算时从标准曲线上选一个点利用公式C对照品/C供试品=A对照品/A供试品来计算吗,标准曲线上所选取的点有什么要求,进样量和供试品的一样吗?在此谢谢大家啦 |
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