24小时热门版块排行榜    

查看: 2761  |  回复: 20
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lilili25

金虫 (初入文坛)

[求助] 肠道内微生物DNA提取后,PCR却无结果 已有13人参与

我用试剂盒提取的肠道微生物的DNA,浓度为120ng/ul ,纯度为1.700,但是16s PCR 却没有产物,我用的是细菌通用引物,27f和1492r.模板也进行了稀释,都没有结果。是什么原因?请大家帮帮忙?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lgn07521

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
DNA纯度不好吧? 我PCR之前测DNA纯度都在1.77到1.83之间时感觉比较好! 还有是不是酶失活了?或者,体系有问题,有时候引物加的量也会引起PCR反应没结果的,总之原因很多,具体要自己摸一套适合自己的体系!
6楼2014-05-19 18:42:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答

happy6

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
做个梯度PCR看一下,建议你先用模版做梯度,然后再考虑其他成分。
2楼2014-05-19 08:56:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你可以先用C3-V5或者其它的,稍微短一些的片段扩增。另外,你的DNA不知道会不会太浓了,稀释十倍试试。
致良知
3楼2014-05-19 10:26:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
做没有阳性对照和阴性对照?会不是是体系和试剂的问题?
排出了试剂的问题,再考虑样品的问题。
环境卫生、微生物学、卫生应急
4楼2014-05-19 12:37:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +8 Tide man 2026-08-11 8/400 2026-08-12 17:30 by Vivilian
[基金申请] 不应该看fileCode +5 且听虎啸 2026-08-12 6/300 2026-08-12 16:26 by Tide man
[基金申请] 长年满屏的广告,版主太不责任了。基金也等的急 +4 gltch 2026-08-12 4/200 2026-08-12 16:08 by eulota
[基金申请] filecode +13 documentary 2026-08-10 15/750 2026-08-12 15:56 by 云上清扬
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +4 majunge000 2026-08-10 4/200 2026-08-12 15:46 by 云上清扬
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
信息提示
请填处理意见