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lingkai11111新虫 (小有名气)
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重组大肠杆菌培养的问题 已有5人参与
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| 各位前辈好，小弟不才，愚钝异常，培养大肠杆菌中出现问题，譬如发酵六瓶（LB转接至TB培养基），有一瓶长的比较正常，另外几瓶要么长不起来一直澄清，要不先浑浊后来澄清(发酵液中有丝状悬浮物），另外有一次培养过夜后菌体都长起来了。总体说，这六瓶较以前正常情况时更粘稠，泡沫也增多，气味更难闻。怀疑是噬菌体感染，但是实验室其他同学做大肠杆菌培养都很正常，另外我用这些发酵液划线没有杂菌，也没出现噬菌斑；之前怀疑菌种老化，但是活化菌种多次，每次都出现相同情况；也想过是培养基优化后C:N变化导致，但是用以前的培养基培养照样出现相同情况！不知道是什么原因，请各位高手不吝指教，小弟感谢不尽。。。 |
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【答案】应助回帖
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zhang8826857: 金币+3, 你懂的O(∩_∩)O 2014-05-19 10:45:35
zhang8826857: 金币+3, 你懂的O(∩_∩)O 2014-05-19 10:45:35
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如果是相同菌种接种的，同时出现了正常和异常的发酵瓶，说明菌种应该是没问题，问题只能是培养基或培养条件。菌种有问题不会出现正常发酵瓶。 接种量在延迟期差异表现比较明显，接种量少的前期一直长不起来。一般按8%左右接种都是没问题的。 种子培养基一般是LB，这个培养基上都长不出来？看看你的菌是否带抗性，再看下你加的抗生素对不对，大肠杆菌在LB上很好长出来啊。或者菌有问题了，换菌种。 |
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lingkai111114楼2014-05-19 09:00:42
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5楼2014-05-19 12:14:02
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8楼2014-05-19 17:25:48
【答案】应助回帖
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| 菌种是不是有污染？这很可能是菌种里带杂菌。一般摇瓶实验染噬菌体不会是培养基或者环境问题，上发酵罐才会有噬菌体的问题吧 |
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9楼2014-05-21 10:20:44
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