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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 重组大肠杆菌培养的问题
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战斗节能

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

注意操作，诱导剂什么的 ！
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11楼2014-05-31 16:03:02
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fish珊

银虫 (初入文坛)
我也出现这个问题，一直本着侥幸心理在摇菌，但是最近太严重了，什么都摇不起来。请问楼主你解决了么。
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12楼2015-01-20 11:25:16
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可蕊

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你的菌是BL21吗？如果是，摇的过程中会出现菌体不生长或生长一段时间后死亡的现象
你可以试着从生长一段时间后发酵液变澄清再继续生长的摇瓶内筛菌，或者重新做感受态
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13楼2015-02-28 15:31:34
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nemo88

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
14楼2016-02-12 18:00:21
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fudan671

木虫 (著名写手)
污染的可能性高，需要加抗性。

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15楼2016-02-13 12:54:34
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哟哟哟24

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 可蕊 at 2015-02-28 15:31:34
你的菌是BL21吗？如果是，摇的过程中会出现菌体不生长或生长一段时间后死亡的现象
你可以试着从生长一段时间后发酵液变澄清再继续生长的摇瓶内筛菌，或者重新做感受态

你们的问题解决了么，最近做毕设也出现这种问题了

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16楼2017-03-30 10:58:36
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zonka

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lingkai11111 at 2014-05-19 08:30:07
这次是接种量不一样，不过以前平行的也是这种情况。。。昨天种子培养基都没长起来啊。。。是不是菌种活化的问题？...

我的也是，有的时候，活化转接的种子都长不起来
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17楼2017-06-29 12:31:54
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275987281

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

之前出现这种情况，部分长部分不长，继续培养能长起来，但是镜检结果不咋好。后面加大接种量（BL21菌株是有点不稳定，怀疑是质粒丢失，加入抗生素后会淘汰一部分，相当于有效菌株减少，所以长得慢）。还有个怀疑就是染菌（因为转种需求与时间节点考虑，只能使用棉塞，棉塞灭完后会带部分水汽，有染菌风险，所以把冷却后的摇瓶放在传递窗里开紫外灯进行吹淋和紫外消杀），还有加强手部、器具及空间消毒，情况有很大改善，你可以参考参考。
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18楼2025-05-28 11:52:17
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