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lingkai11111

新虫 (小有名气)

[求助] 重组大肠杆菌培养的问题 已有5人参与

各位前辈好,小弟不才,愚钝异常,培养大肠杆菌中出现问题,譬如发酵六瓶(LB转接至TB培养基),有一瓶长的比较正常,另外几瓶要么长不起来一直澄清,要不先浑浊后来澄清(发酵液中有丝状悬浮物),另外有一次培养过夜后菌体都长起来了。总体说,这六瓶较以前正常情况时更粘稠,泡沫也增多,气味更难闻。怀疑是噬菌体感染,但是实验室其他同学做大肠杆菌培养都很正常,另外我用这些发酵液划线没有杂菌,也没出现噬菌斑;之前怀疑菌种老化,但是活化菌种多次,每次都出现相同情况;也想过是培养基优化后C:N变化导致,但是用以前的培养基培养照样出现相同情况!不知道是什么原因,请各位高手不吝指教,小弟感谢不尽。。。
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哟哟哟24

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 可蕊 at 2015-02-28 15:31:34
你的菌是BL21吗?如果是,摇的过程中会出现菌体不生长或生长一段时间后死亡的现象
你可以试着从生长一段时间后发酵液变澄清再继续生长的摇瓶内筛菌,或者重新做感受态

你们的问题解决了么,最近做毕设也出现这种问题了

发自小木虫Android客户端
16楼2017-03-30 10:58:36
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感觉像是染菌,六瓶培养基是平行的吗?个别瓶子染菌见过,还没见过每次都是这么染菌的。
2楼2014-05-18 21:02:32
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lingkai11111

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by laozuzunzhe at 2014-05-18 21:02:32
感觉像是染菌,六瓶培养基是平行的吗?个别瓶子染菌见过,还没见过每次都是这么染菌的。

这次是接种量不一样,不过以前平行的也是这种情况。。。昨天种子培养基都没长起来啊。。。是不是菌种活化的问题?
3楼2014-05-19 08:30:07
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
zhang8826857: 金币+3, 你懂的O(∩_∩)O 2014-05-19 10:45:35
如果是相同菌种接种的,同时出现了正常和异常的发酵瓶,说明菌种应该是没问题,问题只能是培养基或培养条件。菌种有问题不会出现正常发酵瓶。
接种量在延迟期差异表现比较明显,接种量少的前期一直长不起来。一般按8%左右接种都是没问题的。
种子培养基一般是LB,这个培养基上都长不出来?看看你的菌是否带抗性,再看下你加的抗生素对不对,大肠杆菌在LB上很好长出来啊。或者菌有问题了,换菌种。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2014-05-19 09:00:42
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