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mars731

新虫 (初入文坛)

[求助] 新人求助 菌类蛋白电泳样品怎样制备 已有1人参与

不知道怎样操作,之前样品都跑不出条带,操作没问题,应该是样品处理不对,求正确方法!菌是平板培育的
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junboliang

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by mars731 at 2014-05-17 12:40:02
就是可以取菌直接加loading buffer煮沸5min,制备?...

可以的,我做蛋白表达的时候就这么做,可以试一下
6楼2014-05-17 13:07:07
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junboliang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
先收集平板上的菌,离心后超声破菌或者直接加一定量的强裂解液!
2楼2014-05-17 11:41:21
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mars731

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by junboliang at 2014-05-17 11:41:21
先收集平板上的菌,离心后超声破菌或者直接加一定量的强裂解液!

谢谢,震荡裂解可不可以?
3楼2014-05-17 12:08:30
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junboliang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
mars731: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-05-17 16:51:24
建议在PBS中直接超声!或者用loading buffer裂解,当然这样就无法测蛋白浓度了;你也可以配一种裂解液,就是loading buffer去掉溴酚蓝,这样既可以裂解充分,也可以测蛋白浓度。
4楼2014-05-17 12:33:29
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