应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 克隆5KB左右的基因，两个多月了还没进展，求帮忙啊！！！！
221/3返回列表123下一页
查看: 2001  |  回复: 21
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

米粒儿308

铁虫 (初入文坛)

[求助] 克隆5KB左右的基因，两个多月了还没进展，求帮忙啊！！！！ 已有9人参与

本人是个新手，现在要克隆个5kb的基因，已经进行了两个多月了还没进展，不知道该怎么办，那位大侠能帮帮忙啊？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-05-13 16:20:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2014-05-13 18:00:07
没进展是什么个情况，能说仔细点么?

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2014-05-13 17:31:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luwei13566

木虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2014-05-15 16:02:30
基因够大的，你现在都做了哪几种方法做不出来啊？
赞一下 回复此楼
大家相互帮助哈
3楼2014-05-13 18:00:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

BioChen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 很赞同，要写的详细点，就一个做不出来，原因可能多了去了。 2014-05-16 13:11:39
gyesang: 回帖置顶 2014-05-16 13:12:53
新手克隆5k基因，2个月没有进展正常。如果你的实验室是小实验室，很少有人有克隆方面的经验的话，给你一年你未必能克隆出来。
把你实验的信息多写点上来，不然没法帮你。
赞一下 回复此楼
4楼2014-05-13 18:25:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DavinciTesla

铜虫 (初入文坛)
体液配方没弄好吧！

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
5楼2014-05-13 18:31:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wakasasa

银虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2014-05-15 16:03:20
我克隆四k的没出来……然后克隆两k的扩增出来个四k的，奇葩不？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
445566
6楼2014-05-13 18:42:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DAX1

新虫 (小有名气)
★
米粒儿308(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-15 16:03:39
5k的确有点大，要是再遇上gc含量高的，或者引物设计区域重复多的话就更难的。建议楼主去mgc的cdna库看看，是否有你的全长基因，大概一个100多美金。如果你够幸运的话，在addgene里面说不定能找到别人提交的，这样就更便宜了，几十美金。
赞一下 回复此楼
7楼2014-05-13 19:21:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

米粒儿308

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wakasasa at 2014-05-13 18:42:05
我克隆四k的没出来……然后克隆两k的扩增出来个四k的，奇葩不？

我扩了个6、7K的出来。。。。
赞一下 回复此楼
8楼2014-05-15 14:50:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

米粒儿308

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by BioChen at 2014-05-13 18:25:28
新手克隆5k基因，2个月没有进展正常。如果你的实验室是小实验室，很少有人有克隆方面的经验的话，给你一年你未必能克隆出来。
把你实验的信息多写点上来，不然没法帮你。

我用primer 3 input 在线设计了两对引物，用PCR扩后条带如图，不是预期的大小能帮我指点下是怎么回事么？我引物预期的片段大小4800左右，谢谢啦
克隆5KB左右的基因，两个多月了还没进展，求帮忙啊！！！！
2014-05-14_Sx col-0(1)_8bit.png
赞一下 回复此楼
9楼2014-05-15 14:55:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

米粒儿308

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-05-13 17:31:27
没进展是什么个情况，能说仔细点么?

设计了几对引物都没扩出来，后来用的primer 3 input在线设计了两对引物，扩出来的片段却不预期的大
赞一下 回复此楼
10楼2014-05-15 14:57:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 米粒儿308 的主题更新
221/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料工程085601，270求调剂 +36 @ASDF1234 2026-04-08 38/1900 2026-04-13 08:14 by qingpingzhu
[考研] 297求调剂 +17 ORCHID1 2026-04-10 18/900 2026-04-12 09:59 by zhouwenxian
[考研] 307求调剂 +10 tzq94092 2026-04-10 10/500 2026-04-12 08:18 by wise999
[考研] 347求调剂 +4 mhyqyy 2026-04-06 4/200 2026-04-12 02:27 by 秋豆菜芽
[考研] 270求调剂 +14 杨乐369 2026-04-11 14/700 2026-04-11 20:16 by 蓝云思雨
[考研] 调剂求助 +6 果然有我 2026-04-11 7/350 2026-04-11 16:22 by 明月此时有
[考研] 085501机械专硕 302分 不挑专业求调剂 +7 汪某. 2026-04-09 7/350 2026-04-11 14:37 by luhong1990
[考研] 265求调剂 +12 风说她早忘了 2026-04-10 13/650 2026-04-10 18:56 by chemisry
[考研] 085404 298分求调剂 +10 呼啦呼啦呼呼呼 2026-04-10 11/550 2026-04-10 16:44 by wangy0907
[考研] 298求调剂 +13 钉叮咚冬瓜 2026-04-09 13/650 2026-04-10 15:49 by jiajinhpu
[考研] 337求调剂 +4 Gky09300550， 2026-04-09 4/200 2026-04-09 17:18 by 帕尔马拉特
[考研] 本科郑州大学，一志愿华东师范大学282求调剂 +23 熊哥xtk 2026-04-07 26/1300 2026-04-09 17:17 by 18446523
[考研] 求机械专硕297第二批调剂 +5 拾柒12。 2026-04-08 5/250 2026-04-09 16:43 by 允当适度
[考研] 085400电子信息类（川大控制工程）求调剂可跨专业 求老师联系 +3 626776879 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:05 by 猪会飞
[考研] 368化学求调剂 +13 wwwwabcde 2026-04-07 14/700 2026-04-09 14:47 by heaven_jay
[考研] 生物学308分求调剂（一志愿华东师大） +13 相信必会光芒万� 2026-04-06 16/800 2026-04-09 13:54 by 徐良白眉大侠
[考研] 一志愿211，化学学硕，310分，本科重点双非，求调剂 +10 努力奋斗112 2026-04-07 10/500 2026-04-08 15:01 by screening
[考研] 电子信息346 +4 zuoshaodian 2026-04-08 4/200 2026-04-08 11:54 by zzucheup
[考研] 313求调剂 +3 十六拾陆 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:20 by lbsjt
[考研] 22408 331分求调剂 +4 y__1 2026-04-06 4/200 2026-04-06 17:26 by 土木硕士招生
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭