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米粒儿308

铁虫 (初入文坛)

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[求助] 克隆5KB左右的基因，两个多月了还没进展，求帮忙啊！！！！已有9人参与

本人是个新手，现在要克隆个5kb的基因，已经进行了两个多月了还没进展，不知道该怎么办，那位大侠能帮帮忙啊？

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1楼 2014-05-13 16:20:16

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BioChen

银虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

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gyesang: 金币+3, 很赞同，要写的详细点，就一个做不出来，原因可能多了去了。 2014-05-16 13:11:39
gyesang: 回帖置顶 2014-05-16 13:12:53

新手克隆5k基因，2个月没有进展正常。如果你的实验室是小实验室，很少有人有克隆方面的经验的话，给你一年你未必能克隆出来。
把你实验的信息多写点上来，不然没法帮你。

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4楼2014-05-13 18:25:28

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Neo2000

木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

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gyesang: 回帖置顶 2014-05-16 13:12:04

你绕了那么远，还是没说到实验细节上，一个劲的说整不出来，有意义吗？你用什么酶，程序，引物都没交代，我真帮不了你

[ 发自小木虫客户端 ]

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12楼2014-05-15 15:06:42

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米粒儿308

铁虫 (初入文坛)

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gyesang: 回帖置顶 2014-05-16 13:12:17

引用回帖:

12楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-05-15 15:06:42
你绕了那么远，还是没说到实验细节上，一个劲的说整不出来，有意义吗？你用什么酶，程序，引物都没交代，我真帮不了你

额，新手，不太会使用介个，见谅哈~
引物是上游：ctaaacgcgtaccggtcaat
      下游 ttctggcagcttttgtttcc
      模版：拟南芥基因组DNA
      酶：KOD -PLUS-NEO
      程序predenature:94度  2分钟
            denature:    98度  10秒
            annealing:    59度  30秒
         extension:    68度 2分30秒
         30个循环

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14楼2014-05-15 15:14:39

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