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maxrog

新虫 (初入文坛)

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[求助] 荧光定量PCR 校准组的设置？求助已有1人参与

请教各位大神一个问题，我们使用多个临床样本进行半定量荧光定量PCR，检测3种基因，那每板上的校准样本需要设立吗？是选择正常人还是肿瘤细胞系？他们一般是用一批次的CDNA还是通过重组克隆质粒提取DNA进行荧光半定量PCR呢？

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1楼 2014-05-08 16:17:18

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junnavme2014

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【答案】应助回帖

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-05-08 21:52:12

你指得校准组是什么？标准曲线？如果是做相对定量的话你可以选用对照的模板将目标带和看家基因的产物PCR扩增出来，然后以扩增产物为模板做梯度稀释（1：10：100：1000：10000），以它们为模板做标准曲线，你后面的所有在样品的实验都以标准曲线获得的结果做对照

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