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柠檬可乐星

新虫 (小有名气)

[求助] 正向测序测成功,反向却测失败是什么原因? 已有1人参与

各位大神:我的片段是1800bp,先测了一个正向反应,是对的,然后要求公司测通,我自己提供的中间引物,结果反向测序失败,请问这是什么原因啊?
为什么正向成功了,继续测反向还会失败呢?
求指点!急啊!
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越努力越幸运
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yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-04-26 23:52:34
我也碰到过这种情况,他们说可能是序列内有特殊结构。一般情况下会调整测序方法。
学习使你立于不败之地
2楼2014-04-26 23:15:58
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柠檬可乐星

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yuren2009 at 2014-04-26 23:15:58
我也碰到过这种情况,他们说可能是序列内有特殊结构。一般情况下会调整测序方法。

调整测序方法是可以继续测下去的意思还是我要重新PCR送测呢?
越努力越幸运
3楼2014-04-27 09:27:56
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yuren2009

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 柠檬可乐星 at 2014-04-27 09:27:56
调整测序方法是可以继续测下去的意思还是我要重新PCR送测呢?...

测序失败又不收你钱。他们调整测序方法,不用重新送样。
学习使你立于不败之地
4楼2014-04-27 10:06:22
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柠檬可乐星

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yuren2009 at 2014-04-27 10:06:22
测序失败又不收你钱。他们调整测序方法,不用重新送样。...

钱都是小事,不用重新送样最好,要不还得重P,多耽误时间
越努力越幸运
5楼2014-04-27 11:04:58
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mou6278

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 柠檬可乐星 at 2014-04-27 11:04:58
钱都是小事,不用重新送样最好,要不还得重P,多耽误时间...

你好,我也遇见了这样的问题,我单子填的测通,但是结果有的正向反向一个测序成功一个测序失败,你的怎么解决的啊,还要重新送样吗?
6楼2014-09-16 17:07:14
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柠檬可乐星

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by mou6278 at 2014-09-16 17:07:14
你好,我也遇见了这样的问题,我单子填的测通,但是结果有的正向反向一个测序成功一个测序失败,你的怎么解决的啊,还要重新送样吗?...

因为我的模板很少经不起折腾,后来全部做克隆送测了,虽然麻烦些,但是成功率高
越努力越幸运
7楼2014-09-22 07:41:50
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