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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 正向测序测成功，反向却测失败是什么原因？
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柠檬可乐星

新虫 (小有名气)

[求助] 正向测序测成功，反向却测失败是什么原因？ 已有1人参与

各位大神：我的片段是1800bp，先测了一个正向反应，是对的，然后要求公司测通，我自己提供的中间引物，结果反向测序失败，请问这是什么原因啊？
为什么正向成功了，继续测反向还会失败呢？
求指点！急啊！
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越努力越幸运
1楼 2014-04-26 20:12:23
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yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-04-26 23:52:34
我也碰到过这种情况，他们说可能是序列内有特殊结构。一般情况下会调整测序方法。
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学习使你立于不败之地
2楼2014-04-26 23:15:58
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柠檬可乐星

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yuren2009 at 2014-04-26 23:15:58
我也碰到过这种情况，他们说可能是序列内有特殊结构。一般情况下会调整测序方法。

调整测序方法是可以继续测下去的意思还是我要重新PCR送测呢？
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越努力越幸运
3楼2014-04-27 09:27:56
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yuren2009

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 柠檬可乐星 at 2014-04-27 09:27:56
调整测序方法是可以继续测下去的意思还是我要重新PCR送测呢？...

测序失败又不收你钱。他们调整测序方法，不用重新送样。
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学习使你立于不败之地
4楼2014-04-27 10:06:22
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柠檬可乐星

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yuren2009 at 2014-04-27 10:06:22
测序失败又不收你钱。他们调整测序方法，不用重新送样。...

钱都是小事，不用重新送样最好，要不还得重P，多耽误时间
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越努力越幸运
5楼2014-04-27 11:04:58
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mou6278

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 柠檬可乐星 at 2014-04-27 11:04:58
钱都是小事，不用重新送样最好，要不还得重P，多耽误时间...

你好，我也遇见了这样的问题，我单子填的测通，但是结果有的正向反向一个测序成功一个测序失败，你的怎么解决的啊，还要重新送样吗？
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6楼2014-09-16 17:07:14
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柠檬可乐星

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by mou6278 at 2014-09-16 17:07:14
你好，我也遇见了这样的问题，我单子填的测通，但是结果有的正向反向一个测序成功一个测序失败，你的怎么解决的啊，还要重新送样吗？...

因为我的模板很少经不起折腾，后来全部做克隆送测了，虽然麻烦些，但是成功率高
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越努力越幸运
7楼2014-09-22 07:41:50
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