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正反向测序问题已有1人参与
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本人最近将一外源片段和质粒利用EcoRV与MluI酶切后连接，挑去单克隆进行测序。分别设计正反向引物，反向引物测序结果显示目的基因后半部分正确，正向引物测序结果很乱（发现将正向引物测序结果和反向测序结果align后，这两个测序序列基本相同，将两个序列结果assemble测序显示目的基因后半部分正确，故得不到前半部分结果）。第一次怀疑引物设计出现问题，第二次利用T7通用引物再次正向测，结果同第一次。不知道问题出现在了哪里？ 求高手指教。 [ Last edited by nnbj on 2014-1-3 at 20:11 ] |
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