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bw2318木虫 (小有名气)
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肌原纤维蛋白的提取问题?
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准确称量一定量的肉样绞碎,添加肉样量4倍体积的磷酸缓冲液,高速匀浆1min,然后离心15min(2000g、4℃),倒出上清液,重复以上步骤两次。然后用4倍体积的NaCl溶液冲洗沉淀,高速匀浆30s,然后离心15min(2000g、4℃),倒出上清液。将8倍体积NaCl溶液与沉淀混合,并用四层纱布过滤。调整混合溶液的pH为6.2,然后离心15min(2000g、4℃),倒掉上清液,剩余残渣就是肌原纤维蛋白。 问题1:最后用的2次NaCl 清洗,为什么第一次是弃去清液,而第二次是留下清液? 问题2:最后调节pH值时,几乎不用调节就到6.2了,这就更加不清楚第一次NaCl的作用了。。 求指导下哈,有做过的朋友吗?? |
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