24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 19092  |  回复: 38

河水流云

木虫 (正式写手)

[交流] 跟大家讨论一下EDC-NHS活化带羧基颗粒的用量问题 已有4人参与

本人最近在做将一个带羧基的颗粒连接到一个带羧基的颗粒表面,用的是EDC-NHS活化的方法
通过查阅相关知识得出羧基比EDC为1:10的量,EDC:NHS约1:5
我的颗粒是通过表面包裹PAA(聚丙烯酸),其单体的相对分子质量为72
我用300mg的PAA包裹我的颗粒,则300mgPAA理论上含有4.2mmol羧基,假设我的颗粒表面实际的羧基总量在最终活化时为3mmol
那么EDC则要30mmol也就是要用5.75g
而NHS则用75mmol,也就是8.63g
通过这样一估算感觉这EDC和NHS的用量也太大了,我不知道问题出在那了,求大神指点一下,回头小红花献上
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

羧基活化EDC|DCC,NHS 纳米粒子EDC蛋白偶联 NHS-EDC使用简介 叶酸
酰胺键交联(EDC/NHS)

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

阿斯蒂芬

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不用过量这么多倍。
我自己做的往蛋白上接,羧基的量和EDAC的量比是1:1.2~1.5.
EDAC:NHS是1:1

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2014-04-18 21:17:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jane-zhu

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主首先你计算不严密,你用的是聚丙烯酸,那就不能按照单体的分子量72算。据我所知,聚丙烯酸根据聚合度不同,分子量也不同(我用过1800的)。还有你用300mg包裹你的颗粒,那么你能确定这300mg全部包裹上去而没有损失吗

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

年年岁岁花相似,岁岁年年人不同。
5楼2014-04-19 15:36:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

河水流云

木虫 (正式写手)

引用回帖:
16楼: Originally posted by wlicecream at 2014-12-15 22:32:35
你好!我现在也在用EDC和NHS连羧基和氨基,情况和你说的类似,连接效率极低,请问你当初是在水中做的还是DMF中做的,现在问题解决了吗?需要注意什么才能连上啊?温度?PH?不胜感激...

在水中,现在解决了,主要是活化时间,活化羧基时间15min不能再长了,
17楼2014-12-16 19:05:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

河水流云

木虫 (正式写手)

引用回帖:
19楼: Originally posted by 苍耳心 at 2015-01-23 10:23:03
请问不需要在PBS中吗? 是先将带羧基的和EDC、NHS 加一起,然后再加入带氨基的吗?...

是先在MES pH6左右,加EDC NHS 活化15min, 然后离心,再在PBS pH7活化过夜就行
20楼2015-01-23 12:10:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

河水流云

木虫 (正式写手)

自己顶一个
2楼2014-04-18 17:51:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

河水流云

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 阿斯蒂芬 at 2014-04-18 21:17:14
不用过量这么多倍。
我自己做的往蛋白上接,羧基的量和EDAC的量比是1:1.2~1.5.
EDAC:NHS是1:1

连接效果怎么样,能告诉我一下您的操作过程吗,我要具体一点,特别是反应时间以及在用EDC-NHS活化后第二步与氨基反应的时候要不要对带羧基的蛋白洗涤,要洗几次?
谢谢

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2014-04-18 22:07:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinwei331

至尊木虫 (文坛精英)

…………………………
6楼2014-04-19 15:48:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

河水流云

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by Jane-zhu at 2014-04-19 15:36:34
楼主首先你计算不严密,你用的是聚丙烯酸,那就不能按照单体的分子量72算。据我所知,聚丙烯酸根据聚合度不同,分子量也不同(我用过1800的)。还有你用300mg包裹你的颗粒,那么你能确定这300mg全部包裹上去而没有损 ...

因为每个单体上有一个羧基所以按72也只是算个大概,你说的确实是问题所在,其实这个问题就是在于我的颗粒上的所有羧基到底是在那一个数量级范围。这样的话用EDC的量就不好确定了。
7楼2014-04-20 08:55:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

河水流云

木虫 (正式写手)

自己顶一个
8楼2014-04-20 22:46:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jane-zhu

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 河水流云 at 2014-04-20 08:55:02
因为每个单体上有一个羧基所以按72也只是算个大概,你说的确实是问题所在,其实这个问题就是在于我的颗粒上的所有羧基到底是在那一个数量级范围。这样的话用EDC的量就不好确定了。...

这个个人觉得要摸索,调到合适的浓度梯度范围

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

年年岁岁花相似,岁岁年年人不同。
9楼2014-04-22 09:44:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

河水流云

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by Jane-zhu at 2014-04-22 09:44:19
这个个人觉得要摸索,调到合适的浓度梯度范围...

嗯,其实我只要能连上就行了,这玩意我做了一个多月一直没做出来,不知道是包PAA出问题了还是修饰氨基出问题了还是这边的活化出问题了,后面验证觉得最有可能是这边活化出问题了,以后不懂的再向你请教
10楼2014-04-22 16:01:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 河水流云 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 河北省自然科学基金 +5 Peterchao 2026-05-18 8/400 2026-05-24 11:58 by 晓晓爱翠翠
[基金申请] 西安交大新媒学院副院长用撤稿论文结题 +3 bjvtcliu 2026-05-24 5/250 2026-05-24 10:16 by kudofaye
[教师之家] 某211大学教师把个人教师官方主页改成:我跑了我跑了我跑了!官宣跑路! +4 zju2000 2026-05-21 5/250 2026-05-24 09:35 by songwz
[考博] 26/27申博自荐 10+4 ZXW0202 2026-05-22 9/450 2026-05-24 08:47 by bjvtcliu
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 hvkbtfonbv 2026-05-23 3/150 2026-05-24 08:01 by 9ps9vgkqva
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 pmo95bazuy 2026-05-23 7/350 2026-05-24 06:35 by fpo5ljpv91
[基金申请] 揭秘青基评审内幕:几个A才能顺利中标 +3 国自然国社科中 2026-05-23 4/200 2026-05-23 15:37 by 2000zf36392
[基金申请] 青B发送上会通知了吗 +5 chemBioBro 2026-05-22 7/350 2026-05-23 12:35 by zhuifengzhy
[考博] 博士申请 +3 焦晓明 2026-05-21 3/150 2026-05-23 11:26 by mlc840311
[论文投稿] 投稿求助,期刊 +4 希冀,有书读 2026-05-20 8/400 2026-05-22 10:16 by 希冀,有书读
[文学芳草园] 献血感触 +7 呀呀好傻 2026-05-19 13/650 2026-05-21 20:15 by 呀呀好傻
[基金申请] 面上本子正文33页,违规吗?会被低分嘛? +14 1234567wang 2026-05-17 16/800 2026-05-21 17:58 by 脆脆的饼干
[基金申请] 国自然评分 +4 无名者登山 2026-05-20 5/250 2026-05-21 16:35 by swuq
[基金申请] 国自然上会要求 +7 无名者登山 2026-05-18 11/550 2026-05-21 15:50 by draco1987
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +9 fummck 2026-05-20 10/500 2026-05-21 14:17 by draco1987
[基金申请] 评审有感 +15 popular289 2026-05-18 26/1300 2026-05-21 10:35 by 西葫芦炒鸡蛋
[有机交流] 反应很差,大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[考博] 如果工作了想读博,可以边工作边读全日制嘛? 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
[硕博家园] 我在等一个没有答案的答案 +3 Love_MH 2026-05-17 3/150 2026-05-18 02:22 by 竹林孤影
信息提示
请填处理意见