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河水流云

木虫 (正式写手)

[交流] 跟大家讨论一下EDC-NHS活化带羧基颗粒的用量问题 已有4人参与

本人最近在做将一个带羧基的颗粒连接到一个带羧基的颗粒表面，用的是EDC-NHS活化的方法
通过查阅相关知识得出羧基比EDC为1：10的量，EDC:NHS约1：5
我的颗粒是通过表面包裹PAA（聚丙烯酸），其单体的相对分子质量为72
我用300mg的PAA包裹我的颗粒，则300mgPAA理论上含有4.2mmol羧基，假设我的颗粒表面实际的羧基总量在最终活化时为3mmol
那么EDC则要30mmol也就是要用5.75g
而NHS则用75mmol，也就是8.63g
通过这样一估算感觉这EDC和NHS的用量也太大了，我不知道问题出在那了，求大神指点一下，回头小红花献上
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1楼 2014-04-18 15:35:45
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阿斯蒂芬

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不用过量这么多倍。
我自己做的往蛋白上接，羧基的量和EDAC的量比是1:1.2~1.5.
EDAC：NHS是1：1
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河水流云
3楼2014-04-18 21:17:14
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河水流云

木虫 (正式写手)
自己顶一个
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2楼2014-04-18 17:51:23
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河水流云

木虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 阿斯蒂芬 at 2014-04-18 21:17:14
不用过量这么多倍。
我自己做的往蛋白上接，羧基的量和EDAC的量比是1:1.2~1.5.
EDAC：NHS是1：1

连接效果怎么样，能告诉我一下您的操作过程吗，我要具体一点，特别是反应时间以及在用EDC-NHS活化后第二步与氨基反应的时候要不要对带羧基的蛋白洗涤，要洗几次？
谢谢
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哈呀呀
4楼2014-04-18 22:07:01
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Jane-zhu

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主首先你计算不严密，你用的是聚丙烯酸，那就不能按照单体的分子量72算。据我所知，聚丙烯酸根据聚合度不同，分子量也不同（我用过1800的）。还有你用300mg包裹你的颗粒，那么你能确定这300mg全部包裹上去而没有损失吗
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河水流云
年年岁岁花相似，岁岁年年人不同。
5楼2014-04-19 15:36:34
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