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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 电化学 » 电化学传感器 » 为什么金电极NHS/EDC活化后，交流阻抗变为零？
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沧海一杯

银虫 (正式写手)

[交流] 为什么金电极NHS/EDC活化后，交流阻抗变为零？

为什么金电极NHS/EDC活化后，交流阻抗变为零？并且一抗总是修饰不上，是怎么回事？实验各种纠结！！各种奇怪！！
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1楼 2012-09-19 20:45:13
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dengjfp

铁杆木虫 (著名写手)
★
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NHS/EDC可能没有修饰到金电极上去。
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3楼2012-09-20 08:12:01
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沧海一杯

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by dengjfp at 2012-09-20 08:12:01
NHS/EDC可能没有修饰到金电极上去。

活化这步很困难么？
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4楼2012-09-20 08:49:01
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闵行老张

新虫 (初入文坛)
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沧海一杯: 金币+2 2012-11-26 14:35:04
这就奇怪了，即使是裸金电极，它的阻抗也不可能为零的！再说，在电极表面固载上一层修饰物后，其阻抗肯定要比裸电极的要大，所以，我估计是你的实验出了问题，儿不是电极的问题。
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5楼2012-10-14 14:42:24
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沧海一杯

银虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 闵行老张 at 2012-10-14 14:42:24
这就奇怪了，即使是裸金电极，它的阻抗也不可能为零的！再说，在电极表面固载上一层修饰物后，其阻抗肯定要比裸电极的要大，所以，我估计是你的实验出了问题，儿不是电极的问题。

裸金为什么不能为零？实验重复了几遍，还是这样啊
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6楼2012-10-16 08:59:09
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onlycwt

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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沧海一杯: 金币+10 2012-11-26 14:35:14
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6楼: Originally posted by 沧海一杯 at 2012-10-16 08:59:09
裸金为什么不能为零？实验重复了几遍，还是这样啊...

不知道楼主实验做的怎样了，如果是末端是羧基的硫醇修饰在金电极表面上，在PH7左右的铁氰化钾溶液中扫的话，金电极表面是正电，氧化还原电对也是负电，因此有很大阻抗，当NHS活化后，硫醇的末端应该就呈中性了，此时氧化还原电对很容易就进入电极表面，因此阻抗变得很小了。不知道楼主的抗体那一步有没有修饰上去？
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7楼2012-11-26 11:58:12
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onlycwt

铜虫 (小有名气)
错了，第一句说的是金电极表面在活化前程正电，和氧化还原电对相排斥
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8楼2012-11-26 11:59:17
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沧海一杯

银虫 (正式写手)
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7楼: Originally posted by onlycwt at 2012-11-26 11:58:12
不知道楼主实验做的怎样了，如果是末端是羧基的硫醇修饰在金电极表面上，在PH7左右的铁氰化钾溶液中扫的话，金电极表面是正电，氧化还原电对也是负电，因此有很大阻抗，当NHS活化后，硫醇的末端应该就呈中性了，此 ...

后来在活化这步就不测阻抗了，结果证明，抗体还是能够修饰上的，非常感谢。
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9楼2012-11-26 14:34:39
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onlycwt

铜虫 (小有名气)
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9楼: Originally posted by 沧海一杯 at 2012-11-26 14:34:39
后来在活化这步就不测阻抗了，结果证明，抗体还是能够修饰上的，非常感谢。...

请问楼主你的活化条件是什么？抗体是在什么条件下修饰的呢？我最近也在修饰，先用BSA代替抗体尝试，修饰不上去。
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10楼2012-11-26 16:53:41
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沧海一杯

银虫 (正式写手)
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10楼: Originally posted by onlycwt at 2012-11-26 16:53:41
请问楼主你的活化条件是什么？抗体是在什么条件下修饰的呢？我最近也在修饰，先用BSA代替抗体尝试，修饰不上去。...

末端是羧基的硫醇，EDC/NHS常温下1.5小时，然后就滴涂一抗，就ok了
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onlycwt
11楼2012-11-26 18:36:13
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onlycwt

铜虫 (小有名气)
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11楼: Originally posted by 沧海一杯 at 2012-11-26 18:36:13
末端是羧基的硫醇，EDC/NHS常温下1.5小时，然后就滴涂一抗，就ok了...

多谢~我想问一下EDC/NHS的浓度比和抗体在什么温度下修饰多长时间
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12楼2012-11-26 18:43:38
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沧海一杯

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12楼: Originally posted by onlycwt at 2012-11-26 18:43:38
多谢~我想问一下EDC/NHS的浓度比和抗体在什么温度下修饰多长时间...

EDC/NHS质量比为2:1，需要注意的是，需溶解在咪唑-盐酸溶液中（师姐告诉我的），抗体在常温下静置16h就可以
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onlycwt
13楼2012-11-27 09:05:32
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onlycwt

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13楼: Originally posted by 沧海一杯 at 2012-11-27 09:05:32
EDC/NHS质量比为2:1，需要注意的是，需溶解在咪唑-盐酸溶液中（师姐告诉我的），抗体在常温下静置16h就可以...

多谢，怪不得我总是不对，可否麻烦楼主告知咪唑-盐酸溶液的浓度？
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14楼2012-11-27 12:11:09
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沧海一杯

银虫 (正式写手)
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14楼: Originally posted by onlycwt at 2012-11-27 12:11:09
多谢，怪不得我总是不对，可否麻烦楼主告知咪唑-盐酸溶液的浓度？...

这个我还真不知道，师姐在我做实验前就配好了，稍等，明天答复，
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onlycwt
15楼2012-11-27 14:28:31
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onlycwt

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15楼: Originally posted by 沧海一杯 at 2012-11-27 14:28:31
这个我还真不知道，师姐在我做实验前就配好了，稍等，明天答复，...

好的，纠结了好久啊，别人的文献总是不能重现出来
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16楼2012-11-27 14:52:08
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沧海一杯

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16楼: Originally posted by onlycwt at 2012-11-27 14:52:08
好的，纠结了好久啊，别人的文献总是不能重现出来...

用盐酸调节咪唑溶液的ph至7.0左右即可，具体的查查文献看看
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onlycwt
17楼2012-11-28 11:39:23
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onlycwt

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17楼: Originally posted by 沧海一杯 at 2012-11-28 11:39:23
用盐酸调节咪唑溶液的ph至7.0左右即可，具体的查查文献看看...

谢谢~我试试看
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18楼2012-11-28 20:54:55
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米Love

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9楼: Originally posted by 沧海一杯 at 2012-11-26 14:34:39
后来在活化这步就不测阻抗了，结果证明，抗体还是能够修饰上的，非常感谢。...

我想请问楼主，如果末端是羧基的PEG修饰在金电极表面，用EDC和NHS活化后我用阻抗测变得很小，如果不测阻抗，怎么表征抗体修饰上去了呢？谢谢
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19楼2014-11-04 18:57:36
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wasxnbe2楼
2012-09-19 21:17   回复  
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