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河水流云

木虫 (正式写手)

[交流] 跟大家讨论一下EDC-NHS活化带羧基颗粒的用量问题 已有4人参与

本人最近在做将一个带羧基的颗粒连接到一个带羧基的颗粒表面,用的是EDC-NHS活化的方法
通过查阅相关知识得出羧基比EDC为1:10的量,EDC:NHS约1:5
我的颗粒是通过表面包裹PAA(聚丙烯酸),其单体的相对分子质量为72
我用300mg的PAA包裹我的颗粒,则300mgPAA理论上含有4.2mmol羧基,假设我的颗粒表面实际的羧基总量在最终活化时为3mmol
那么EDC则要30mmol也就是要用5.75g
而NHS则用75mmol,也就是8.63g
通过这样一估算感觉这EDC和NHS的用量也太大了,我不知道问题出在那了,求大神指点一下,回头小红花献上
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酰胺键交联(EDC/NHS)

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河水流云

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by Jane-zhu at 2014-04-22 09:44:19
这个个人觉得要摸索,调到合适的浓度梯度范围...

嗯,其实我只要能连上就行了,这玩意我做了一个多月一直没做出来,不知道是包PAA出问题了还是修饰氨基出问题了还是这边的活化出问题了,后面验证觉得最有可能是这边活化出问题了,以后不懂的再向你请教
10楼2014-04-22 16:01:41
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河水流云

木虫 (正式写手)

自己顶一个
2楼2014-04-18 17:51:23
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阿斯蒂芬

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不用过量这么多倍。
我自己做的往蛋白上接,羧基的量和EDAC的量比是1:1.2~1.5.
EDAC:NHS是1:1

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3楼2014-04-18 21:17:14
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河水流云

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 阿斯蒂芬 at 2014-04-18 21:17:14
不用过量这么多倍。
我自己做的往蛋白上接,羧基的量和EDAC的量比是1:1.2~1.5.
EDAC:NHS是1:1

连接效果怎么样,能告诉我一下您的操作过程吗,我要具体一点,特别是反应时间以及在用EDC-NHS活化后第二步与氨基反应的时候要不要对带羧基的蛋白洗涤,要洗几次?
谢谢

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4楼2014-04-18 22:07:01
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