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河水流云

木虫 (正式写手)

[交流] 跟大家讨论一下EDC-NHS活化带羧基颗粒的用量问题 已有4人参与

本人最近在做将一个带羧基的颗粒连接到一个带羧基的颗粒表面，用的是EDC-NHS活化的方法
通过查阅相关知识得出羧基比EDC为1：10的量，EDC:NHS约1：5
我的颗粒是通过表面包裹PAA（聚丙烯酸），其单体的相对分子质量为72
我用300mg的PAA包裹我的颗粒，则300mgPAA理论上含有4.2mmol羧基，假设我的颗粒表面实际的羧基总量在最终活化时为3mmol
那么EDC则要30mmol也就是要用5.75g
而NHS则用75mmol，也就是8.63g
通过这样一估算感觉这EDC和NHS的用量也太大了，我不知道问题出在那了，求大神指点一下，回头小红花献上
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1楼 2014-04-18 15:35:45
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Jane-zhu

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 河水流云 at 2014-04-20 08:55:02
因为每个单体上有一个羧基所以按72也只是算个大概，你说的确实是问题所在，其实这个问题就是在于我的颗粒上的所有羧基到底是在那一个数量级范围。这样的话用EDC的量就不好确定了。...

这个个人觉得要摸索，调到合适的浓度梯度范围
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河水流云
年年岁岁花相似，岁岁年年人不同。
9楼2014-04-22 09:44:19
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河水流云

木虫 (正式写手)
自己顶一个
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2楼2014-04-18 17:51:23
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阿斯蒂芬

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不用过量这么多倍。
我自己做的往蛋白上接，羧基的量和EDAC的量比是1:1.2~1.5.
EDAC：NHS是1：1
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河水流云
3楼2014-04-18 21:17:14
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河水流云

木虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 阿斯蒂芬 at 2014-04-18 21:17:14
不用过量这么多倍。
我自己做的往蛋白上接，羧基的量和EDAC的量比是1:1.2~1.5.
EDAC：NHS是1：1

连接效果怎么样，能告诉我一下您的操作过程吗，我要具体一点，特别是反应时间以及在用EDC-NHS活化后第二步与氨基反应的时候要不要对带羧基的蛋白洗涤，要洗几次？
谢谢
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哈呀呀
4楼2014-04-18 22:07:01
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