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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 果蔬 » 多酚氧化酶活性测定吸光度一直上升
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Anjo_

新虫 (初入文坛)

[交流] 多酚氧化酶活性测定吸光度一直上升

我最近在做多酚氧化酶活性的测定实验，取20mL, pH为6.5的磷酸盐缓冲液( PBS, 005mol/L)于试管中,加入0.1mol/L的邻苯二酚10mL, 在35℃条件下保温10min后, 快速加入05mL粗酶液, 混匀后于420nm测定反应体系吸光值( OD)。每隔30s记录1次OD值, 共计时3min。以每分钟吸光值改变0.001为1个酶活力单位(U)。

按照这种方法记录的吸光度，一直是上升的，每隔30s记录一次数据，记录了16次，吸光度的值还是上升的趋势，这样的结果正常吗？
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1楼 2014-04-16 12:08:31
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答非所问

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ET.....

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酶的活力是你一段时间内，时间-OD图线的斜率。。。而不是吸光值，吸光值只要你的反应没有到终点，都会有产物生成，会一直增大，这是正常的。。
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2楼2014-05-01 16:22:02
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Anjo_

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 答非所问 at 2014-05-01 16:22:02
酶的活力是你一段时间内，时间-OD图线的斜率。。。而不是吸光值，吸光值只要你的反应没有到终点，都会有产物生成，会一直增大，这是正常的。。

我懂了，因为不是食品专页的，所以刚开始做这个实验的时候疑惑很多

谢谢你的解答~
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3楼2014-05-07 15:49:51
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答非所问

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ET.....

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引用回帖:
3楼: Originally posted by Anjo_ at 2014-05-07 15:49:51
我懂了，因为不是食品专页的，所以刚开始做这个实验的时候疑惑很多

谢谢你的解答~...

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4楼2014-05-07 21:50:03
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Anjo_

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 答非所问 at 2014-05-07 21:50:03
懂了就好~~~~~~~~~记得给金币哦...

我还想再问一下，测出来的吸光度，到底怎么算酶活力，是以每分钟吸光值改变0.001为一个酶活力单位，还是一段时间内，时间—OD值得斜率呢？
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5楼2014-05-08 12:07:40
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zh_ying

银虫 (小有名气)
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我想问一下，我测的时候OD值是降低的，你有没有遇到过这种情况？怎么解决的

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6楼2016-01-08 10:27:51
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苏苏_22

新虫 (初入文坛)
★
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我想问下你怎么设的空白？我也在测多酚氧化酶的活性，但我发现我的空白调零管好像有问题，我都不知道怎么测了，求帮助，谢谢

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7楼2016-06-07 14:52:02
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