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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » dna提取中关于测定吸光值的问题
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zhang592001

新虫 (初入文坛)

[求助] dna提取中关于测定吸光值的问题已有2人参与

我看到有的文献上说 dna的纯度是靠A280/260的值可以初步的估计  然后在260的吸光值要大于0.1才算有效的  请问这个0.1 是用多少的te溶液溶解的？？？？？
补充 ： 我用的是ctab法 样品为100μL   最后加无水乙醇沉淀的时候大概有300μL上清。 有点儿急 谢谢
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1楼2014-04-16 11:31:04
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for5

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang592001(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-16 19:23:25
这个要看你提取样品初始量多少，一般能提多少量，不确定的时候用的体积小点，用nanodrop也就1ul就能测了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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操蛋的XX
3楼2014-04-16 11:38:59
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for5

木虫 (正式写手)
这个要看你提取样品初始量多少，一般能提多少量，不确定的时候用的体积小点，用nanodrop也就1ul就能测了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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操蛋的XX
2楼2014-04-16 11:38:48
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zhang592001

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by for5 at 2014-04-16 11:38:59
这个要看你提取样品初始量多少，一般能提多少量，不确定的时候用的体积小点，用nanodrop也就1ul就能测了

谢谢你的回复  但是如果量比较少的话 我测吸光值的时候 液体的高度打不到那个光孔 这不就测不出来了么
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4楼2014-04-16 13:25:29
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2012csc

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

用多少TE溶解不一定，要看核酸的浓度是多少，因为吸光度与浓度的线性关系是有一定范围的，超出这个范围就无法估计浓度，所以要让od值落在0.1到0.5之间，可以把核酸原液稀释不同倍数，分别测吸光度1，落在这个范围内的才靠谱，由此推算出原液浓度~
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坚持就是胜利！
5楼2014-04-27 15:17:47
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